Genômica comparativa e atividade antimicrobiana de endolisinas fágicas recombinantes contra bactérias Gram-negativas multirresistentes

O tratamento de infecções causadas por bactérias Gram-negativas multirresistentes é um desafio. Enzimas líticas derivadas de bacteriófagos têm sido estudadas como uma solução potencial para o tratamento dessas infecções. Diversos estudos avaliaram o uso de endolisinas contra bactérias Gram-positivas. Em contrapartida, o uso de endolisinas contra bactérias Gram-negativas foi pouco explorado. A ação exógena das endolisinas contra bactérias Gram-negativas é dificultado pela membrana externa. Os estudos que avaliam a ação exógena de endolisinas contra bactérias Gram-negativas se limita ao: (I) uso de endolisinas nativas; (II) uso de endolisinas nativas combinadas com permeabilizadores de membrana externa; e (III) uso de endolisinas engenheiradas. Pesquisas recentes demonstraram que as endolisinas com domínios do tipo signal-anchor-release (SAR) podem permear a membrana externa de bactérias Gram-negativas. O objetivo desta dissertação foi avaliar o arsenal de endolisinas codificadas por bacteriófagos que infectam bactérias Gram-negativas, com foco em endolisinas contendo sequências sinais do tipo SAR, e avaliar a atividade antimicrobiana de SAR-endolisinas contra bactérias Gram-negativas. Esta dissertação encontra-se dividida em quatro capítulos. O primeiro capítulo resumiu o estado da arte sobre o tratamento de infecções causadas por bactérias Gram-negativas com endolisinas. O capítulo dois analisou o arsenal de endolisinas codificadas por bacteriófagos que infectam bactérias Gram-negativas de interesse clínico. O terceiro capítulo analisou o arsenal de SAR-endolisinas a partir de dados metagenômicos. Por fim, o quarto capítulo avaliou a atividade antimicrobiana de uma SAR-endolisina representativa contra bactérias Gram-negativas de interesse clínico, incluindo isolados multirresistentes. A SAR-endolisina LysKpV475 apresentou atividade bacteriostática variando entre 8,125 µg.ml-1 para P. aeruginosa ATCC 27853 e 32,50 µg.ml-1 para K. pneumoniae ATCC BAA-2146 e E. cloacae P2224. Atividade bactericida foi observada para P. aeruginosa ATCC 27853 (32,50 µg.ml-1) e P. aeruginosa P2307 (65,00 µg.ml-1). No entanto, mais estudos são necessários para determinar o papel do domínio SAR e da etiqueta de poli-histidina na atividade antimicrobiana de SAR-endolisinas. Este estudo mostrou o potencial de SAR-endolisinas contra bactérias Gram-negativas (AU)