Produção de inulinase por "Kluyveromyces marxianus" em meios industriais no processo batelada alimentada e purificação em leito expandido

Resumo

As enzimas apresentam diversas propriedades que as tornam interessantes para o uso como biocatalisadores. Entre elas, o fato de poderem atuar em condições brandas e de maneira estereo-seletiva. Neste contexto encontram-se as inulinases que podem ser utilizadas em processos de hidrolise de inulina e na síntese de frutooligossacarídeos. A produção de inulinase por "Kluyveromyces marxianus" em meios sintéticos e industriais vem sendo estudada há alguns anos no Lab. Eng. de Bioprocessos (LEB-FEA-Unicamp). Nesse período, a otimização do processo reduziu até 50 vezes o custo de produção em ensaios fermentativos de batelada simples e atingiu atividades enzimáticas entre 120 U/mL a 1500 U/mL em várias cepas estudadas. Entretanto, para investigar a possibilidade de produção industrial de inulinase em larga escala, as fermentações por "Kluyveromyces marxianus" NRRL Y-7571 serão conduzidas em biorreatores tipo batelada alimentada, que minimizam reações paralelas indesejáveis pela manutenção de concentração limitada de substrato no meio industrial pré-tratado a ser usado. Durante a fermentação serão estudadas as variáveis aeração, agitação e vazão de alimentação, sendo analisadas a atividade enzimática, pH e ART. Em seguida, a metodologia de planejamento experimental será aplicada para o estudo de purificação da enzima em coluna de leito expandido.. Neste caso, serão avaliadas as variáveis pH, molaridade do tampão e fator de expansão na etapa de adsorção, e pH e volume do gradiente salino na etapa de eluição. (AU)