Análise molecular e estrutural da proteína ligadora de maltose (MalE) de Xanthomonas axonopodis pv. citri

Resumo

O trabalho consiste na identificação e clonagem do gene maIE de Xanthomonas axonopodis pv Citri (Xac) no vetor de expressão pET 28ª para produção da proteína MalE em E. coli K12. A proteína purificada será submetida a ensaios voltados para a definição de sua estrutura tri-dimensional, com ênfase para a cristalização e análise por difração de raios- X. Ensaios baseados no dicroísmo circular e fluorimetria serão utilizados para complementar o estudo estrutural da proteína, sobretudo no que tange a alterações conformacionais ocorridas após a ligação ao substrato, maltose. O trabalho prevê ainda a definição de aminoácidos essenciais para a funcionalidade da proteína e a detecção da proteína MaIE, e variações de sua expressão, em linhagens e espécies do gênero Xanthomonas. Os resultados a serem obtidos se enquadram no programa de Biologia Estrutural do Estado de São Paulo (SMoIBNet) e devem contribuir para a avaliação do papel funcional do sistema de transporte de maltose e maltodextrina na fisiologia e patogenicidade de Xac. (AU)