Sequenciamento de uma extremidade do cromossomo 7 de leishmania major e construcao de vetores para estdos funcionais.

Resumo

Estudos recentes em parasitas protozoários demonstram a importância das extremidades dos cromossomos, de forma que estes domínios extremos parecem ser as regiões mais importantes para a plasticidade genética, sendo que nelas localizam-se genes relacionados com processos fundamentais para os seus ciclos de vida. Em Trypanosoma brucei e Plasmodium falciparum proteínas codificadas por genes presentes nas regiões extremas dos cromossomos estão envolvidas em processos de evasão da resposta imune do hospedeiro. Em Leishmania, um grande número de elementos repetitivos tem sido caracterizado, entretanto não há estudos sobre transcritos destas regiões. Nosso laboratório está envolvido na caracterização das regiões extremas dos cromossomos de Leishmania e, até o momento, possuímos mapas de transcrição de três extremidades cromossômicas, sendo que 36,5 kbs de seqüências correspondentes à extremidade do cromossomo 20 já foram determinadas. Desta forma, propomos neste projeto o seqüenciamento do cosmídeo 008B2, que representa uma das extremidades do cromossomo 7 de L. major. Adotaremos uma estratégia baseada no uso do sistema mariner de transposição in vitro que já foi testado e mostrou-se bastante eficiente. Além do seqüenciamento e anotação do cosmídeo B2 propomos a construção de vetores para caracterização funcional do transcrito mais próximo às repetições teloméricas. (AU)