Aspectos epidemiológicos da infecção por Neospora caninum em cães

Resumo

Aspectos epidemiológicos da infecção por Neospora caninum em cães O projeto objetiva avaliar a ocorrência da transmissão vertical da infecção pelo N. caninum em diferentes fases da gestação em cadelas, avaliar diferentes tecidos como meio de transmissão de N. caninum e verificar a importância da idade dos cães na eliminação de oocistos de N. caninum. Serão conduzidos dois experimentos: Experimento I - Avaliação da transmissão vertical da infecção pelo N. caninum durante diferentes fases da gestação em cadelas, Experimento II - Avaliação da possibilidade de transmissão do N. caninum por ingestão de diferentes tecidos de bovinos infectados pelo parasito e avaliação da idade dos cães na infecção e eliminação de oocistos. Nesses experimentos bezerros bovinos serão utilizados como doadores de cistos do parasito. Bezerros serão inoculados com 108 taquizoítos de N. caninum e a infecção será monitorada pela detecção de anticorpos específicos. No Experimento I será realizada a avaliação da transmissão vertical da infecção pelo N. caninum durante diferentes fases da gestação em cadelas. Serão usadas 15 cadelas adultas clinicamente sadias e sorologicamente negativas para N. caninum. Estas cadelas serão divididas em 3 grupos experimentais: grupo I Seis cadelas que serão experimentalmente infectadas por N. caninum na 3ª semana de gestação; Grupo II Seis cadelas que serão infectadas na 6ª semana de gestação e Grupo III Três cadelas prenhas, sem infecção (controle negativo). Três cadelas pertencentes aos grupos I e ao II receberão 108 taquizoítos de N. caninum por via IM na 3ª e na 6ª semana de gestação, respectivamente. As outras três cadelas dos Grupos I e II deverão ingerir ao redor de 100 g de tecidos (cérebro e músculo) de bezerros infectados com N. caninum. As cadelas do Grupo III serão mantidas como controle sem infecção. Colheitas diárias de fezes serão realizadas para pesquisa de oocistos de N. caninum, bem como amostras de soro serão colhidas semanalmente para determinação dos títulos de anticorpos (RIFI). Em caso de abortamentos, amostras da placenta e dos fetos serão colhidas para descrição das lesões macroscópicas e posterior análise histopatológica e imunohistoquímica. Na ausência de abortamentos, os filhotes serão clinicamente avaliados quanto à sua condição física e neurológica e serão sacrificados para a pesquisa de N. caninum em amostras de sistema nervoso central, linfonodos, musculatura esquelética e pulmões. Na presença de oocistos similares ao do N. caninum, a identificação dos mesmos será confirmada por meio de reação em cadeia pela polimerase. No Experimento II serão usados 32 cães filhotes previamente vermifugados, vacinados, clinicamente sadios, sorologicamente negativos para anticorpos anti-N. caninum e negativos para oocistos similares ao N. caninum ao exame coproparasitológico. Os cães serão divididos em oito grupos experimentais, com quatro cães cada. Os grupos 1, 3, 5 e 7 serão formados por filhotes com idade aproximada de 60 dias e os grupos 2, 4, 6 e 8 por cães com idade ao redor de um ano. Serão oferecidos 100 g de tecido fresco sendo: musculatura esquelética (grupos 1 e 2), cérebro (grupos 3 e 4) ou vísceras (grupos 5 e 6) de bezerros infectados por N. caninum. Dois grupos de cães serão mantidos como controle não infectado (grupos 7 e 8). Diariamente serão recolhidas as fezes totais para avaliação da duração e quantidade de oocistos eliminados. Semanalmente serão colhidas amostras de soro para pesquisa de anticorpos anti-N. caninum (RIFI). Os cães serão observados até a soro-conversão de 50% dos animais ou até seis meses após a ingestão dos tecidos (conforme o que ocorrer primeiro). Os oocistos recuperados serão analisados por meio da PCR e inoculação em gerbils. Devido ao grande número de cães que deverão ser diariamente observados, o experimento 2 será realizado em duas etapas, cada uma com dois cães por grupo experimental. (AU)