Avaliação do papel das interações BMP/Wnt na modulação dos processos de diferenciação e maturação das células do folículo dental

Resumo

Células do folículo dental apresentam um importante papel no processo de erupção dental e formação do periodonto. Algumas evidências sugerem que estas células são progenitoras das células dos tecidos periodontais incluindo, cementoblastos, células do ligamento periodontal e osteoblastos. Estudos prévios demonstraram que a proteína óssea morfogenética-2 (BMP-2) pode ser considerada como um fator que estimula a diferenciação e maturação das células do folículo dental em um fenótipo cementoblástico/osteoblástico. Além disso, alguns estudos têm sugerido que a BMP-2 promove um aumento da expressão da ²-catenina durante a diferenciação osteoblástica das células C3H10T1/2. Com base nessas observações, estabelecemos a hipótese de que a BMP-2 induz a diferenciação e maturação das células do folículo dental em um fenótipo cementoblástico/osteoblástico por meio da ativação da ²-catenina endógena via sinalização das Wnts (via canônica). Desta maneira, para avaliar esta hipótese o presente estudo terá como objetivos: 1) determinar o efeito da BMP-2 na via Wnt canônica durante o processo de diferenciação e maturação das células do folículo dental de camundongos em um fenótipo cementoblástico/osteoblástico, 2) avaliar o papel da sinalização celular via Wnt canônica no processo de diferenciação e maturação das células do folículo dental de camundongos. Então, as células do folículo dental serão tratadas com a BMP-2, e avaliadas quanto a expressão dos genes da família Wnt utilizando-se o "Real-time"-PCR, translocação nuclear da ²-catenina pelo Western blot e a atividade da ²-catenina endógena por meio do ensaio de "²-catenina/Tcf reporter". Em seguida, a expressão da ²-catenina endógena será elevada por meio do tratamento com Wnt3a e/ou bloqueada por meio da técnica do siRNA. Serão mensurados os níveis de ²-catenina estabilizada por meio do "Real-Time" PCR, e as células serão avaliadas em relação à expressão de marcadores específicos para osteoblastos/cementoblastos (Runx-2, osteocalcina e sialoproteína óssea e fosfatase alcalina), além da formação de nódulos minerais. (AU)