Analise molecular da extremidade 3 nao traduzida de virus dengue tipo 3 isolados de amostras clinicas.

Resumo

A dengue é a arbovirose humana mais importante atualmente, constituindo-se num sério problema de saúde pública nas áreas tropicais e subtropicais. O agente etiológico é o vírus dengue (família Flaviviridae/gênero Flavivirus) que compreende um complexo antigênico com quatro sorotipos (DENV1-4). As manifestações clínicas incluem infecções de caráter brando, a febre da dengue, ou graves, a febre hemorrágica da dengue e o choque por vírus dengue, responsáveis pelos casos fatais. A patogênese viral não está ainda esclarecida, mas há evidências de que tanto a resposta imunológica do hospedeiro quanto à variação genética do vírus possam estar envolvidas. Uma das questões importantes, no quadro atual de pesquisas, está relacionada ao envolvimento de mutações presentes em certas regiões do genoma com a virulência. A proposta deste projeto consiste na análise molecular da região 3' não traduzida de DENV 3, região está que nos flavivirus apresenta extensiva heterogeneidade tanto de tamanho quanto na composição das bases. Serão analisadas cepas isoladas no Serviço de Virologia do IAL, oriundas de pacientes com graus distintos de severidade de infecções. Os RNAs genômicos serão extraídos, convertidos em cDNA, amplificados por RT-PCR com oligonucleotídeos abrangendo o final do gene NS5 e a extremidade distal da região 3' não traduzida e os fragmentos seqüenciados. As seqüências nucleotídicas obtidas e as estruturas secundárias de RNA previstas para essa região serão comparadas entre si, visando identificar possíveis alterações associadas à virulência. (AU)