Avaliacao de zinco ligados a proteinas de tecidos muscular e hepatico de tilapia do nilo (oreochromis niloticus) utilizando eletroforese 2d page e espectrometria atomica

Resumo

O trabalho busca a otimização de métodos eletroforéticos em 2D para o fracionamento de proteínas nas amostras de tecidos hepático e muscular de tilápia do Nilo e estimativa das massas molares e PI (Ponto Isoelétrico) dessas proteínas por análise das imagens obtidas nos géis de poliacrilamida. Um estudo de mapeamento por SR-XRF dos spots protéicos para identificação qualitativa de íons Zn2+ será feito em seguida, para então, otimizar procedimentos de extração desses íons metálicos dos spots para quantificação por FAAS/GFAAS. Diferentes formas de preparo das amostras para extração das proteínas e diferentes programas de separação por eletroforese 2D-PAGE, serão avaliadas. Na determinação de Zn por FAAS e/ou GFAAS, além do preparo das amostras utilizando a mineralização ácida dos spots protéicos em forno de micro-ondas, será estudada a possibilidade da extração dos analitos metálicos por ultra-som. Nesses estudos, diferentes tempos e potências de agitação ultra-sônica serão avaliados. As determinações serão feitas utilizando-se espectrômetro de absorção atômica SHIMADZU modelo AA-6800. A proposta de trabalho, além possibilitar uma estimativa das metaloproteínas de zinco nas amostras de tecidos hepático e muscular de tilápia do Nilo, poderá também trazer informações importantes para a área de fisiologia e genética de peixes em relação aos estudos do proteoma e metaloma dessa espécie. (AU)