Avaliação do papel das variantes de splicing dos genes TRIM37, BRRN1 e MK-STYX na gênese e progressão do câncer de mama

Resumo

O câncer mamário é uma doença de progressão variável, sendo sua classificação histológica baseada no grau, estadio e tipo de tumor. Dentre os tipos histológicos de neoplasia de mama, o carcinoma ductal é o mais prevalente. Este tipo de tumor é bastante heterogêneo, podendo progredir rapidamente ou não apresentar evolução durante um longo período da doença. Atualmente, um dos maiores desafios na pesquisa molecular nessa área é identificar genes que possam predizer o risco de progressão, e também que sirvam como marcadores de prognóstico. Apesar dos avanços nas pesquisas e enormes esforços para melhorar o tratamento dessas pacientes muito se tem a identificar na caracterização molecular do desenvolvimento e progressão do tumor de mama de modo a permitir ferramentas moleculares mais eficazes e individualizadas tanto para prognóstico, como para tratamentos. Análises recentes têm mostrado a ocorrência de splicing alternativo do mRNA em pelo menos 60% dos genes humanos, sendo que 80% desses eventos ocorrem dentro da região codificadora, aumentando a diversidade proteômica. Inúmeros trabalhos têm identificado formas de splicing alternativo associadas a câncer de mama que podem afetar a função de proteínas. No entanto, a simples identificação da diferença do padrão de splicing em genes envolvidos nesses processos não garante que essa diferença tenha um papel fundamental no tumor, e que apresentem, portanto potencial de marcador molecular, especialmente de alvo terapêutico. Com o objetivo de estudar e identificar variantes de splicing com potencial de marcadores moleculares em câncer de mama, três genes canditatos, TRIM37, MK-STYX e BRRN1, que apresentaram a expressão de exons associados a este tumor foram identificados em estudo prévio do laboratório. Contudo, estudos funcionais são importantes para a avaliação real da contribuição dessas isoformas no desenvolvimento desta patologia. Assim, nesse estudo pretendemos analisar a expressão das respectivas isoformas protéicas supostamente codificadas pelas 3 variantes de splicing e testar seu potencial como marcador de prognóstico. Além disso, o papel biológico das variantes será estudado pelo silenciamento e superexpressão daquelas que se apresentarem diferencialmente expressas nos tumores. Portanto, o estudo funcional das variantes proposto no presente projeto, contribuirá para uma melhor compreensão das variantes de splicing no contexto da gênese e/ou da progressão do câncer de mama.