Processos redox na fisiopatologia vascular da Síndrome de Marfan: papel da dissulfeto isomerase proteica e sua associação com fibrilina-1 e NADPH oxidase

Resumo

Manifestações vasculares da Síndrome de Marfan (SM) induzem morbi-mortalidade, porém mecanismos pelos quais mutações da fibrilina-1, que causam SM, promovem efeitos vasculares não estão claros. Estudos preliminares deste projeto indicam importante interação física entre fibrilina-1 e a chaperona redox PDI (dissulfeto isomerase protéica), que se associa à NADPH oxidase vascular. Além disso, TGF-beta, que contribui para SM, é conhecido agonista da Nox4. Acúmulo intracelular de fibrilina-1 mal-enovelada pode induzir estresse do retículo endoplasmático (RE), que contribui para estresse oxidativo via Nox4 e PDI. O objetivo do projeto é investigar, em camundongos com SM, ocorrência e mecanismos de geração de oxidantes e de estresse oxidativo vascular dependentes da NADPH oxidase, em associação com um papel da PDI e possível convergência com estresse do RE. Objetivos específicos: 1) Confirmar, em cultura de músculo liso de aorta de camundongos normais ou com SM, a associação da PDI com a fibrilina-1; 2) Avaliar, em aortas de camundongos WT ou com SM: produção de oxidantes, índices de estresse oxidativo, expressão de fibrilina-1, NADPH oxidase e marcadores de estresse do RE; 3) Investigar, em modelo de cultura ex vivo de anéis de aorta, o efeito do silenciamento da PDI via siRNA na produção de oxidantes, expressão e localização da fibrilina-1 e marcadores de estresse do RE; 4) Investigar o efeito do tratamento com os antioxidantes tempol e ácido lipóico na dilatação, alterações ultraestruturais e marcadores redox na aorta de camundongos com SM. Estes dados poderão ter novas implicações mecanísticas e terapêuticas na SM. (AU)