Estudo de expressão gênica na resposta de reparação vascular à lesão: efeitos da supressão da dissulfeto isomerase protéica

Resumo

A resposta de reparação vascular à lesão tem amplo significado como protótipo de eventos comuns responsáveis por adaptações fisiológicas ou alterações patológicas em doenças vasculares. Os processos que coordenam a resposta vascular, no entanto, não estão claros. Em nosso grupo, estudamos tal resposta como um modelo de convergência entre estresse oxidativo e estresse do retículo endoplasmático (RE), ambos potencialmente dependentes da dissulfeto isomerase protéica (PDI), uma chaperona do RE associada à NADPH oxidase. Este estudo está ligado à hipótese de que a PDI possa contribuir para sustentar a resposta à reparação vascular e o crescimento da neoíntima após lesão vascular e que sua inibição, mesmo parcial, possa representar uma intervenção capaz de inibir a hiperplasia vascular. Os efeitos da reparação vascular e da PDI, estudados em outros projetos de nosso laboratório, deverão necessariamente ser acompanhados de importantes alterações da expressão gênica, cujo conhecimento deverá indicar alterações em programas fisiológicos específicos. O objetivo deste projeto de iniciação científica é o desenvolvimento e aplicação de um array de PCR para estudo da expressão gênica em artérias ilíacas de coelho após lesão por angioplastia. Os objetivos específicos são: 1) Identificar genes envolvidos nos processos de sinalização celular relevantes a vias pelas quais a PDI modula a resposta vascular à lesão, implicados em programas fisiológicos de resposta a estresse, equilíbrio redox, resposta a proteínas mal-enoveladas, apoptose e outros. Serão confeccionados primers específicos e adaptados ao genoma de coelho para análise em bloco da expressão gênica nas artérias por Array de PCR. 2) Investigar o curso temporal da expressão da PDI durante a resposta vascular à lesão. 3) Testar e padronizar a execução do array de PCR ; 4) Investigar, por meio do array de PCR, o papel da PDI em processos celulares associados à resolução da resposta à lesão. Estes resultados deverão ampliar o entendimento das implicações fisiológicas da modulação de expressão da PDI após lesão vascular. (AU)