O papel da fosforilação na modulação da atividade chaperona de Hsp90 e suas cochaperonas SGT e Aha1

Resumo

Este projeto investiga o papel regulatório da fosforilação na modulação das interações proteína-proteína e atividade chaperona do complexo Hsp90/SGT e Hsp90/Aha1 em Leishmania braziliensis. A Hsp90 atua como uma chaperona molecular assistindo no dobramento, maturação e estabilização de diversas proteínas clientes, além de integrar e coordenar vias de sinalização celular cruciais. Para exercer tais funções, a Hsp90 interage com um grande número de co-chaperonas, incluindo a SGT e Aha1. Estudos prévios indicam que a atividade chaperona do complexo Hsp90 e suas interações com co-chaperonas podem ser reguladas por modificações pós-traducionais, como a fosforilação. Entretanto, os mecanismos e consequências funcionais desta regulação permanecem obscuros. Este projeto investigará o papel modulatório da fosforilação na Hsp90, SGT e Aha1 através de: 1) Mapeamento dos sítios de fosforilação; 2) Geração de mutantes fosfo-deficientes; 3) Análises bioquímicas, estruturais e funcionais destes mutantes quanto a interações proteicas, dinâmica e atividade chaperona. Os resultados trarão novos insights sobre como a sinalização pós-traducional integra e modula a função de chaperonas centrais e redes proteicas associadas. Além disso, poderão auxiliar no planejamento de novas terapias para doenças baseadas em manipulação farmacológica da maquinaria de dobramento de proteínas.