Investigação e Avaliação de Mecanismos Moleculares no Desenvolvimento de Terapia de Precisão Em Meduloblastoma Pediátrico

Resumo

Introdução: os tumores cerebrais pediátricos representam uma causa importante de mortalidade neste segmento etário. O Meduloblastoma (MB) é o tumor pediátrico maligno que mais frequentemente acomete o sistema nervoso central (SNC). Sob o aspecto genético, os MBs classificam-se em quatro subgrupos moleculares distintos (WNT, SHH, Grupo 3 e Grupo 4). Atualmente, características histológicas e moleculares do MB auxiliam na definição de risco e no delineamento terapêutico. Alguns subgrupos moleculares (particularmente MB Grupo 3) correlacionam-se a pior desfecho clínico, onde novas abordagens terapêuticas se fazem necessárias. Objetivos: este estudo se propõe a identificar novos biomarcadores prognósticos em MBs dos Grupos 3 e 4; pretende ainda validar estes biomarcadores, correlacionando-os aos desfechos clínicos e a avaliação de drogas inibidoras de algum dos genes alvo identificados. Material e Métodos: análise in silico de genes diferencialmente expressos (DEGs) nos diferentes subgrupos de MB; validação da expressão diferencial dos genes em amostras tumorais de MB classificadas molecularmente; definição dos biomarcadores hiperexpressos em Grupos 3 e 4 a serem avaliados nos experimentos in vitro; avaliação da expressão destes biomarcadores em linhagens celulares de MB Grupos 3 e 4 (USP-13, D283, Med-114 e D341). Testes funcionais de compostos inibidores dos biomarcadores selecionados (viabilidade celular - MTT; apoptose - citometria fluxo) nas linhagens tratadas, não-tratadas e controle celular não-tumoral (avaliação de toxicidade da droga). Análise estatística: Sobrevida global pelo método de Kaplan-Meier; comparação da sobrevida entre os subgrupos de MB pelo teste de log-rank. Relevância: Espera-se que os genes selecionados no modelo in silico, validados na coorte clínica e que demonstrem perfil antitumoral nas linhagens celulares avaliadas possam direcionar testes pré-clínicos para subgrupos desfavoráveis de MB pediátricos.