Análises ultraestruturais de mitocôndrias expressando a oxidase alternativa.

Resumo

Tecnologias modernas como a microscopia crioeletrônica (CRYO-EM) e tomografia crioeletrônica (CRYO-ET) nos permitem investigar componentes celulares em escala nanoscópica, o que favorecem estudos para melhor elucidação do funcionamento de organelas e de arranjos macromoleculares dentro do contexto celular. No caso de organelas como a mitocôndria, a utilização de CRYO-ET nos permite analisar toda a compartimentação e disposição das estruturas mitocondriais, assim como toda a ultraestrutura desta organela a partir da disposição das cristas. Entretanto o processamento de dados de CRYO-ET é uma tarefa que demanda grande poder computacional e profissionais devidamente qualificados para realização desta tarefa de alta especificidade, uma vez que precisam de vasto conhecimento de biologia estrutural e do uso de softwares robustos para obtenção e processamento deste tipo de dado. Desta forma este bolsista é importante para se aprimorar em técnicas de processamento de imagens de CRYO-ET, programação e estabelecimento de estrutura de hardwares para esta técnica. O candidato fara uso de amostras de CRYO-ET obtidas de mitocôndrias larvas de Drosophila melanogaster e de mitocôndrias de células humanas (HEK-293T e BJ-5ta) com e sem a expressão da oxidase alternativa, fazendo uso de softwares como IMOD, Amira (ThermoFisher) e FijI para geração de modelos de estruturas 3D e obtenção de medições parâmetros estruturais a partir dos dados de CRYO-ET. Com estes dados processados esperamos contribuir com o projeto, mostrando possíveis efeitos da expressão da oxidase alternativa na arquitetura mitocondrial.