Expressão de miRNAs em células de melanoma inibidas para RMEL3 e UHMK1.

Resumo

O melanoma é o tipo mais agressivo de câncer de pele por possuir alta capacidade metastática. A proteína quinase com motivo de homologia U2AF 1 (UHMK1) é descrita principalmente como reguladora de fatores de splicing, implicando na tradução proteica. Análises realizadas com dados do The Cancer Genome Atlas (TCGA) mostraram que amostras de tumores de pacientes de melanoma cutâneo possuem maior expressão de UHMK1 em relação ao tecido normal, enquanto 15% desses possuem alterações que levam ao aumento da expressão gênica (dados não publicados). Ainda, UHMK1 foi observada sendo capaz de regular eventos de splincing alternativo de NRAS e MP3K3, moléculas importantes de vias canonicamente descritas para o desenvolvimento do melanoma. O lncRNA RMEL3, amplamente expresso em melanoma mostrou-se positivamente relacionada a expressão de UHMK1 no melanoma (dados não publicados). Ambos os genes se relacionam com transição epitélio-mesenquimal. Ademais análises com dados do TCGA mostraram miRNAs regulados negativamente em amostras com alto RMEL3 (dados não publicados). Três desses miRNAs - miR-200a, miR-200b and miR-944 - são preditos como interatores de sequências alvo no mRNA de UHMK1, indicando possível regulação da expressão de UHMK1 por esses miRNAs. Nossa hipótese é que RMEL3 pode regular a expressão de UHMK1 por meio do sequestro desses miRNAs e, portanto, inibir a ação sobre o mRNA de UHMK1. Para testar a hipótese, será avaliada a expressão gênica e proteica de UHMK1, bem como os níveis dos miRNAs mencionados, em células inibidas para RMEL3. Também será avaliado a expressão de RMEL3 e dos miRNAs mencionados células nocaute para UHMK1. Assim, pretende-se elucidar a relação entre as moléculas RMEL3 e UHMK1 e mecanismos de regulação associados a UHMK1 que podem estar relacionados a vias associadas a melanogênese.