Translocação bacteriana como fonte de imprint na glândula mamária bovina: desvendando a via êntero-mamária

Resumo

Avanços recentes nas técnicas moleculares alimentaram um interesse crescente na exploração de comunidades comensais de microrganismos na glândula mamária bovina, onde estas populações podem influenciar a prevenção ou promoção de doenças. A crença tradicional na esterilidade da glândula mamária é agora desafiada, com opiniões conflitantes na literatura. Alguns propõem a presença de uma microbiota da glândula mamária, enquanto outros defendem a esterilidade. A possibilidade de circulação enteromamária em ruminantes carece de evidências robustas, mas o período pré-parto, marcado por alterações hormonais, pode facilitar a migração de células do sistema imunológico que transportam bactérias viáveis para a glândula mamária através do sistema linfático. Surge a hipótese de que a via enteromamária bovina funciona durante o período pré-parto, facilitando a translocação bacteriana através das células do sistema imunológico. Para testar esta hipótese, dez vacas holandesas serão amostradas em três momentos: M I) momento da secagem; M II) 10 dias antes do parto; M III) 3 dias após o parto. Serão coletadas amostras do ápice do teto, colostro, líquido ruminal, fezes, sangue e linfa para análise bacteriológica e espingarda. A extração de DNA de todas as amostras será feita utilizando o kit MolYsis complete 5. Para análise shotgun, o Illumina Nextera XT será utilizado no equipamento Novaseq 6000. As sequências dos conjuntos de dados serão processadas através do metaWRAP. Leituras de alta qualidade serão montadas usando as bibliotecas emparelhadas metaSPAdes. A taxonomia de cada contig será estimada com parâmetros blastn com NCBI_nt como banco de dados embutido no módulo MetaWRAP-Blobology. A análise estatística e a construção de gráficos serão realizadas com RStudio. Grupos com distribuição paramétrica serão analisados por ANOVA unidirecional. O teste de Wilcoxon será utilizado para comparar dois grupos não pareados. As diferenças serão consideradas significativas quando P < 0,05.