Avaliação da cooperação entre variantes nos genes RAS e HIPK2 na gênese e progressão do Câncer diferenciado de tiroide

Resumo

O câncer é a segunda causa de mortes no mundo. O câncer de tiroide especificamente é o tipo mais comum a acometer a região da cabeça e pescoço. Este câncer vem experimentando um aumento na sua incidência nos últimos anos. O aumento deste número parece estar relacionado com a melhora na sensibilidade de exames diagnósticos que podem detectar nódulos tireoidianos. Mutações na família de oncogenes genes RAS figuram entre as mais comuns no câncer de tiroide. Modelos in vitro e in vivo tem demonstrado que a presença de uma variante patogênica em RAS, isoladamente, não é suficiente para a transformação maligna das células foliculares da tiroide. Com a cooperação com variantes patogênicas em outros genes "drivers", como PTEN, ocorre um aumento no potencial de transformação maligna das células da tiroide. Neste sentido, nosso grupo analisou 120 casos de carcinoma da tiroide e identificou àqueles com mutações em RAS. Por meio do Sequenciamento do RNA (RNA-Seq) dessas amostras, identificamos variantes em 4 genes da via Hippo (PAK1, RASSF4, HIPK2 e DVL1) que coocorrem com mutações nos genes RAS. Neste projeto iremos avaliar se a variante no gene HIPK2 (p.R117Q) pode aumentar o potencial de transformação maligna da variante p.Q61R no gene NRAS na linhagem celular de tiroide normal de rato (PCCL3). Para isso, as variantes serão clonadas em vetor de expressão e serão transfectadas isoladamente (NRAS ou HIPK2) ou em associação (NRAS e HIPK2) nas células PCCL3. Estudos in vitro serão realizados para avaliar o efeito biológico da cooperação de HIPK2 e RAS nas taxas de proliferação, migração, invasão, apoptose e na ativação das vias MAPK e Hippo. (AU)