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Avaliação do epidídimo após injeção intravasal de antígenos do SARS-CoV-2, com ênfase na resposta das células claras

Processo: 23/11482-8
Modalidade de apoio:Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Mestrado
Vigência (Início): 01 de abril de 2024
Vigência (Término): 30 de setembro de 2024
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Morfologia - Citologia e Biologia Celular
Pesquisador responsável:Estela Sasso Cerri
Beneficiário:André Acácio Souza da Silva
Supervisor: Maria Agustina Battistone
Instituição Sede: Faculdade de Odontologia (FOAr). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
Local de pesquisa: Massachusetts General Hospital, Estados Unidos  
Vinculado à bolsa:22/10560-2 - RESPOSTA IMUNOLÓGICA DO EPIDÍDIMO DE CAMUNDONGOS TRANSGÊNICOS K18-hACE2 INFECTADOS COM SARS-COV-2, COM ÊNFASE NA CÉLULA CLARA, BP.MS
Assunto(s):Epididimo   Macrófagos   SARS-CoV-2   COVID-19   Reprodução   Fertilidade
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Célula clara | epidídimo | Macrófagos | SARS-CoV-2 | Biologia da reprodução

Resumo

A pandemia global de COVID-19, causada pelo SARS-CoV-2, levou a milhões de mortes em todo o mundo. Desde o início da pandemia, estudos mostram que homens são mais suscetíveis à infecção. O epidídimo é essencial para a fertilidade masculina, pois os espermatozoides adquirem motilidade e capacidade de fertilização por meio do contato com o ambiente luminal altamente especializado deste órgão. A célula clara, uma das células mais abundantes no epidídimo, regula o pH do líquido luminal por meio do recrutamento de V-ATPase para a membrana apical. Entretanto, estudos recentes mostram que essa célula pode atuar como imunorreguladora no epidídimo. Em um estudo recente, Battistone e seu grupo de pesquisa mostraram que células claras expressam citocinas e quimiocinas pró-inflamatórias em resposta à injeção de LPS e que essas células podem ter uma correlação íntima com macrófagos e células dendríticas presentes no epidídimo. Em nosso estudo com camundongos transgênicos K18-hACE2 infectados com SARS-CoV-2, mostramos aumento da expressão de TNF-± nas células claras do epidídimo e um aumento de macrófagos intraepiteliais em todas as porções do epidídimo. O objetivo deste estudo é avaliar, com a colaboração da Dr. Maria Agustina Battistone, a resposta imune do epidídimo com ênfase nas células claras após injeção epididimal intravasal de lisado purificado de SARS-CoV-2. Para isso serão utilizados animais transgênicos que expressam marcadores para células claras (ATP6V1B1-EGFP) ou fagócitos mononucleares (CXCR1-EGFP ou CD11c-YFP). Usando a técnica de injeção intravasal, desenvolvida no laboratório da Dr. Battistone, pretendemos injetar lisados purificados de SARS-CoV-2 no lúmen epididimário e avaliar o RNA-seq das células claras e fagócitos mononucleares. Serão também avaliados os tipos de células imunes presentes no epidídimo após o estímulo por citometria de fluxo. A ativação dos fagócitos mononucleares será avaliada por dupla imunofluorescência de células claras e fagócitos mononucleares, e analisada sob microscopia de alta resolução. Os dados obtidos serão analisados por testes estatísticos. (AU)

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