Avaliação dos efeitos antifúngicos e imunomodulatórios de nanopartículas inorgânicas associadas a polifenóis naturais sobre Candida albicans e Candidose Bucal

Resumo

O presente trabalho tem como objetivo avaliar os efeitos antifúngicos e imunomodulatórios das nanopartículas de ouro e nanopartículas de ferro (Np) associadas a polifenóis naturais (curcumina, ácido gálico ou resveratrol) sobre Candida albicans, utilizando-se de modelos de estudo in vitro e in vivo. Para isso, o projeto será distribuído em oito etapas: 1) Avaliação dos efeitos antifúngicos das Np associadas à polifenóis sobre culturas planctônicas de C. albicans por meio dos testes de concentração inibitória mínima, concentração fungicida mínima e curva de morte; 2) Análise da toxicidade das NPs com polifenóis em linhagens celulares de macrófagos e queratinóctios; 3) Compreensão dos efeitos dessas nanoformulações sobre os fatores de virulência de C. albicans, incluindo a capacidade de filamentação e formação de biofilme; 4) Avaliação dos efeitos fisiológicos e moleculares das Np sobre as células fúngicas, investigando-se o conteúdo de ergosterol, produção de radicais oxidativos, peroxidação lipídica, alterações ultraestruturais em microscópio eletrônico de transmissão e expressão de genes; 5) Estudo da influência das nanoformulações na interação macrófago-Candida por meio de ensaios de fagocitose, produção de radicais oxidativos, atividade fungicida dos macrófagos e capacidade de proliferação intracelular de C. albicans; 6) Testes in vivo das nanoformulações no modelo experimental de Galleria mellonella, utilizando-se ensaios de toxicidade, contagem de hemócitos, curva de sobrevivência e quantificação de C. albicans; 7) Seleção da nanoformulação com maior eficácia antifúngica e incorporação em uma matriz de hidrogel, seguida por caracterização física e ensaios de atividade antifúngica em culturas planctônicas; 8) Avaliação dos efeitos da nanoformulação em hidrogel no tratamento da candidose bucal utilizando-se modelo murino de estomatite protética por meio da recuperação de C. albicans, análise histológica, análise da inflamação clínica e atividade enzimática da mieloperoxidase e N-acetilglucosaminidase. Os resultados serão submetidos a uma análise exploratória para a seleção do teste estatístico mais adequado para cada experimento desse estudo, considerando-se nível de significância de 5%. (AU)