Metilação do DNA e expressão gênica de genes relacionados à obesidade em cultura de adipócitos

Resumo

A obesidade emergiu como um problema de saúde pública de extrema importância. A maior preocupação com a doença baseia-se em sua associação com diversas outras doenças que estão ligadas ao aumento da mortalidade. A obesidade tem uma etiologia complexa e multifatorial e alguns estudos mostram que a interação entre fatores genéticos e ambientais, como comportamento alimentar ou atividade física, modula fortemente o risco de desenvolvimento de obesidade. Além disso, evidências indicam que existe um padrão de metilação do DNA associado à obesidade. A validação de genes e alvos específicos pode oferecer novos tratamentos e um olhar sobre a heterogeneidade dos indivíduos com a doença, de forma a fornecer terapia personalizada para a obesidade e as diversas comorbidades associadas. Objetivos: 1) Conhecer o funcionamento e as metodologias de um laboratório de ponta em estudos de epigenômica; 2) Adquirir novos conhecimentos sobre técnicas de cultura celular e adipogênese in vitro de forma a enriquecer e ampliar as metodologias utilizadas no projeto de mestrado em andamento no Brasil; 3) Avaliar os níveis de metilação do DNA e expressão gênica de genes relacionados à obesidade em cultura de adipócitos. Metodologia: Células fibroblásticas (pré-adipócitos) da linhagem C3H10 (ATCC) serão submetidas à diferenciação através do processo de adipogênese. Os adipócitos já diferenciados passarão pelo processo de extração de DNA e RNA para o processo de análise de metilação por pirosequenciamento e análise de expressão gênica por PCR em tempo real (qPCR). (AU)