Efeitos do ácido oleico no cultivo de oócitos e/ou embriões na biossíntese e abundância de transcritos envolvidos na síntese de prostaglandina F2± e E2

Resumo

A mortalidade embrionária precoce, ocasionada entre o 14º e 19º dias após a fertilização, determina 20a 40% de perdas em fêmeas bovinas de corte. A redução de tal mortalidade, pelo favorecimento doreconhecimento materno-fetal, torna-se de fundamental interesse econômico nas operações de cria.Estratégias para tal, objetivam reduzir a capacidade de síntese da PGF2± pelo endométrio materno e/oumaximizar o estímulo anti-luteolítico induzido pelo concepto, inclusive aumentando a síntese de PGE2.No período compreendido entre o 14 e 19º dias após a fertilização, a redução na síntese de PGF2± aliadaao aumento na produção de PGE2 caracterizam uma condição benéfica ao estabelecimento da prenhez.O ácido oleico (C18:1 cis-9; ácido graxo ômega-9 insaturado) determina modificações na via metabólicado ácido graxo poli-insaturado n-6 na biossíntese de eicosanoides, incluindo as prostaglandinas (PG).Reportou-se que a suplementação com ácido oleico em meios de culturas celulares afeta a síntese dePG, entretanto tal efeito não foi avaliado no cultivo de oócitos e embriões bovinos produzidos in vitro.A hipótese é que a suplementação com ácido oleico no meio de cultura de maturação de oócitos in vitro(MIV) e no cultivo de embriões in vitro (CIV) aumenta a síntese de PGE2 e reduz a síntese de PGF2±por alterar a abundância de transcritos envolvidos na síntese das PG. Objetiva-se determinar os efeitosda suplementação com ácido oleico na MIV ou CIV sobre a síntese de PGE2 e PGF2± e na abundânciade transcritos envolvidos na síntese das PG (PTGER2, PTGER4, PTGES1, PLA2G10, PTGS2,PTGES2, AKR1B1, AKR1C4). Oócitos serão colocados em placas de 4 poços, contendo 25oócitos/poço equitativamente distribuídos em um dos quatro tratamentos, onde serão maturados em 500µL meio base MIV/poço suplementado ou não com ácido oleico (Sigma O1383) em diferentesconcentrações (0, 500, 750 ou 1000 µM) e o CIV será prosseguido em 500 µL de meio base paraCIV/poço para todos os tratamentos (Experimento 1) e, 25 oócitos/poço equitativamente distribuídosem um dos quatro poços onde serão maturados in vitro (MIV) em 500 µL meio base MIV/poço e o CIVserá prosseguido em 500 µL meio base para CIV/poço suplementado ou não com ácido oleico emdiferentes concentrações - 0, 500, 750 ou 1000 µM (Experimento 2). Serão realizadas 8 repetiçõesexperimentais para a MIV e 8 repetições experimentais para o CIV, onde a cada repetição será cultivadoinicialmente 25 oócitos por grupo de tratamento. As concentrações de PGE2 e PGF2± no meio de cultivoserão determinadas por ensaio de imunoabsorção enzimática - ELISA. A abundância de transcritos seráavaliada por RT-qPCR. A análise estatística será realizada pelo PROC MIXED do SAS. Considerandoas perdas econômicas ocasionadas pela mortalidade embrionária precoce na fase de cria, caso venha aser comprovado um efeito benéfico de tal suplementação, tal conceito possibilitará a determinação deestratégias a campo que possam reduzir a mortalidade embrionária precoce e, desta forma, melhorar astaxas de concepção em programas de inseminação artificial em tempo fixo (IATF) e transferência deembriões em tempo fixo (TETF).