Caracterização funcional de genes de tomate que codificam proteínas da família B-box e seus interatores

Resumo

As proteínas B-Box (BBX) são fatores de transcrição (TF) do tipo dedos de zinco caracterizados pela presença de pelo menos um domínio B-Box. Em Arabidopsis thaliana, elas foram classificadas em cinco grupos estruturais e funcionalmente descritas como importantes reguladores da fotomorfogênese, floração, evitação de sombreamento, respostas bióticas e abióticas e, até, de vias de sinalização hormonal. Em tomate, Solanum lycopersicum, 31 genes codificantes de BBX foram identificados e classificados em seis grupos estruturais. Existem poucos genes SlBBXs caracterizados funcionalmente, os quais participam da regulação de importantes processos, como fotomorfogênese, metabolismo da auxina de ácido jasmônico (JA), carotenogênese, síntese de antocianinas, tolerância ao estresse por calor e frio, e floração. Até o momento, o modo de ação das proteínas BBX tem sido associado ao desempenhado pelos TFs clássicos, interagindo fisicamente com outras proteínas reguladoras e/ou motivos de DNA nos promotores dos genes alvo. No entanto, não há informações sobre genes BBX sendo regulados ou regulando genes-alvo por mecanismos epigenéticos. Neste contexto, este projeto tem como objetivo obter e caracterizar funcionalmente linhagens de tomateiro mutantes nulas para SlBBX17, SlBBX24, e seus interatores SlHDA8 (deacetilase de histona) e SlLHP1a (trimetilase de Lys27 de histona H3), usando o sistema CRISPR-Cas9 (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats), visando desvendar sua função no desenvolvimento vegetativo e reprodutivo e, portanto, seu possível papel na qualidade nutricional. (AU)