Análise da expressão de receptores olfatórios em células heterólogas HEK293T, e o impacto da presença de SNPs no transporte destes receptores para a membrana plasmática

Resumo

Os receptores olfatórios (ORs) constituem a maior família gênica de receptores acoplados à proteína G em mamíferos. Originalmente, eles são expressos no epitélio olfatório e têm como função a detecção de moléculas odorantes, através da transdução de sinal no neurônio olfatório. Conjuntos exclusivos de ORs são ativados por determinados odorantes, sendo possível determinar essa ativação através da expressão destes receptores em sistemas heterólogos. No entanto, sabe-se que quando expressos em células heterólogas, não há expressão ou há pouca expressão dos ORs na membrana plasmática, pois o receptor fica retido no retículo endoplasmático.Diante de tal problemática, estudos anteriores demonstraram que a inserção de um Rho-tag à extremidade N-terminal dos ORs, bem como a presença de proteínas transportadoras de receptores (RTPs) são capazes de promover a expressão funcional destes receptores na membrana das células HEK293T e aumentar a resposta a estímulos de odorantes.Tendo em vista a existência de uma diversidade genética nos genes de ORs, é possível ocorrer alterações de um nucleotídeo ao longo da sequência de genes, denominado como SNP. Suas consequências para a função de um OR ainda são incertas e, nesse sentido, nosso grupo de pesquisa procurou avaliar a presença de SNPs distintos e em diferentes frequências em genes dos receptores olfatórios das populações nativas da Amazônia e do México, a partir do sequenciamento genômico realizado pelo Projeto de Diversidade do Genoma Humano (HDGP).Diante do exposto, neste projeto visa-se verificar a influência dos SNPs no transporte dos ORs para a membrana plasmática, de modo a avaliar seus efeitos na expressão funcional dos genes de receptores olfatórios em células heterólogas HEK293T por meio da técnica de imunofluorescência.