Análise proteômica e histológica de rins de camundongos com diabetes mellitus tipo 2 tratados com diferentes concentrações de fluoreto na água de beber

Resumo

O diabetes mellitus (DM) é um doença de grande impacto social, e as perspectivas são de que a sua prevalência aumente ainda mais, devido ao estilo de vida das pessoas. Dentre os diversos tipos de diabetes, o tipo 2 (DM2) é o que apresenta maior prevalência (90%). A patogênese do DM2 é complexa, e está envolvida com uma progressão da resistência insulínica no fígado e tecidos periféricos, acompanhada a uma secreção defeituosa de insulina pelas células ² pancreáticas, levando a hiperglicemia. Recentes estudos vêm indicando que o fluoreto (F) pode influenciar na resistência/sensibilidade à insulina de camundongos. Desta forma, estudos que correlacionem o DM com a administração de fluoreto são de grande importância, uma vez que o F está presente na água de abastecimento público e em produtos odontológicos. Sabendo-se que o rim é o principal órgão responsável pela excreção/retenção do F, o objetivo deste estudo é avaliar as alterações proteômicas e histológica ocasionadas pelo tratamento crônico com F por duas doses (10mgF/L e 50mgF/L) no rim de camundongos com DM2 induzidos por meio de uma dieta hiperlipídica e pela administração de estreptozotocina. Para tanto, foram utilizados 30 camundongos adultos machos da linhagem C57BL/6J, os quais foram divididos em três grupos experimentais (n=10), de acordo com a dose de F, administrada na água de beber, a saber: D0 (0mgF/L), D10 (10mgF/L) e D50 (50mgF/L). Os animais receberam uma dieta hiperlipídica e após alcançarem 30g e no mínimo 8 semanas, receberam injeções diárias de estreptozotocina (STZ) intraperitoneal de 40mg/kg, por 3 dias, após uma semana, constatada a diabetes (9 semanas), glicemia e200mg/dL, iniciou-se o tratamento com F por 21 dias (3 semanas). Um grupo com 10 camundongos da linhagem C57BL/6 foi utilizado como controle. Os mesmos passaram pelo o mesmo período experimental, recebendo água sem F e dieta normocalórica. Decorrido o período experimental, os animais foram eutanasiados para a coleta das amostras, sendo o rim direito coletado para as análises histológicas e o rim esquerdo para a análise proteômica. Para a análise histológica do rim, as amostras serão processadas e coradas com hematoxilina-eosina, ácido periódico-Schiff e Tricrômico de Masson. Para a análise proteômica quantitativa livre de marcadores (software Protein Linx Global Service) o rim esquerdo será processando seguindo protocolo estabelecido pelo laboratório. Após verificação da normalidade e homocedasticidade dos dados, os mesmos serão submetidos a análises estatísticas apropriadas (p<0,05).