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Obtenção de fragmentos de anticorpos (scFv e Fab) recombinantes selecionados via Phage Display contra as toxinas termo-lábil (LT) e termo-estável (ST) produzidas por Escherichia coli enterotoxigênica

Processo: 22/13313-6
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de janeiro de 2023
Vigência (Término): 31 de dezembro de 2023
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Saúde Coletiva - Saúde Pública
Pesquisador responsável:Daniela Luz Hessel da Cunha
Beneficiário:Yuuki Yamamoto
Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Anticorpos de cadeia única   Diarreia   Escherichia coli   Toxinas bacterianas
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:anticorpos recombinantes | Diarréia | Escherichia coli | Etec | Lt | St | Toxinas bacterianas

Resumo

A doença diarreica é um dos principais problemas de saúde pública mundial, causando cerca de 1,5 milhão de mortes anuais em crianças abaixo de cinco anos de idade, sendo que, cerca de 30 a 40% dos episódios de diarreia aguda no mundo são causados pelas Escherichia coli diarreiogênicas, destacando-se o patotipo responsável pela diarreia aguda/diarreia do viajante, a E. coli enterotoxigênica (ETEC). ETEC produz as toxinas termoestável (ST) e termolábil (LT). Essas toxinas são os principais fatores de virulência, portanto, excelentes alvos para o diagnóstico da diarreia causada por estes patógenos e para a terapia da intoxicação. Dentre as melhores ferramentas tanto para o desenvolvimento de testes imunossorológicos como para a terapia de neutralização, destacam-se os anticorpos. A partir da tecnologia do DNA recombinante e da laureada técnica de Phage Display, é factível o desenvolvimento de anticorpos recombinantes de maneira mais rápida e com baixo custo, como fragmentos scFv e Fab que podem, inclusive, serem produzidos em bactérias, um avanço frente aos monoclonais produzidos por hibridomas que demandam tempo e mão de obra especializada para sua obtenção. Ao longo dos anos, nosso grupo de pesquisa no Laboratório de Bacteriologia do Instituto Butantan, vêm obtendo com sucesso anticorpos, incluindo os recombinantes, e padronizando métodos de diagnóstico para os patotipos epidemiologicamente importantes de Escherichia coli diarreiogênica. Neste contexto, este projeto tem como objetivo a obtenção de fragmentos de alta afinidade contra as toxinas LT e ST de ETEC a partir da técnica de Phage Display, que após serem purificados e caracterizados serão testados como ferramentas de diagnóstico e terapia desses patógenos.

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