Influência do tempo de infecção sobre o perfil microbiológico (bactérias e fungos), citotóxico e inflamatório da comunidade microbiana de infecções endodônticas secundárias/persistentes

Resumo

A permanência de microrganismos no sistema de canais radiculares (SCR), assim como sua recontaminação são os principais fatores etiológicos do insucesso do tratamento endodôntico. A microbiota do canal radicular, seu perfil citotóxico e o sistema imunológico do hospedeiro são os principais responsáveis pelo curso da inflamação apical, assim como pelo sucesso e longevidade do tratamento endodôntico. Considerando a importância dos microrganismos persistentes ao tratamento endodôntico, sua atividade antigênica e a interação com o organismo hospedeiro para o sucesso do tratamento endodôntico o presente estudo tem como objetivos caracterizar e avaliar a microbiota (bactérias/fungos) de casos indicados ao retratamento endodôntico convencional devido à presença de periodontite apical crônica após diferentes tempos de insucesso clínico, assim como os níveis de endotoxinas (LPS) e ácido lipoteicóico (LTA) associados as infecções endodônticas e dos biomarcadores inflamatórios IL-1±, IL-1², TNF±, MMP-2, MMP-3, MMP-8, MMP-9, MMP-13 e substância P. Para identificação e detecção dos microrganismos serão selecionados 40 pacientes com necessidade de retratamento endodôntico devido a presença de lesão periapical subdivididos em 4 grupos determinados pelo tempo transcorrido desde o tratamento endodôntico primário. O conteúdo microbiológico, citotóxico e as citocinas serão coletadas do SCR pela técnica do cone de papel absorvente estéril. O DNA extraído será submetido ao sequenciamento NGS (Next Generation Sequencing). As concentrações de endotoxina (LPS) serão determinadas através do método turbidimétrico de LAL. Será realizado ainda ensaio imunoenzimático de ELISA para quantificação de citocinas inflamatórias e ácido lipoteicóico (LTA). Os dados obtidos serão analisados através de pipelines bioinformáticos para diversidade já os resultados dos demais estudos serão devidamente tabulados e estatisticamente analisados através do SPSS 23 para Windows.