Investigação da expressão do gene CXCL8 após o tratamento periodontal de indivíduos com Diabetes Mellitus tipo 2

Resumo

O Diabetes Mellitus tipo 2 (DM2) e Periodontite (P) são duas doenças que tem sido cada vez mais habitual encontrar concomitantemente nos pacientes no tempo presente. A Periodontite é uma desordem imuno-inflamatória multifatorial mediada pelo hospedeiro em resposta à disbiose microbiana, e tem sido reconhecida como a sexta maior complicação associada ao DM2, pois foi detectada maior extensão e severidade da Periodontite em indivíduos portadores de DM2. O DM2 também é uma doença multifatorial com resposta inflamatória exacerbada. No DM2 ocorrem alterações no metabolismo de carboidratos, seguido de proteínas e lipídios, devido disfunção da secreção ou sensibilidade celular à insulina. A Interleucina 8 (IL-8, ou CXCL8) é uma importante citocina pró-inflamatória, quimiotática para neutrófilos, atuando na primeira linha de defesa do sistema imune, e tem participação confirmada na Periodontite, tendo sido identificada na gengiva e fluido gengival. Previamente, nosso grupo de pesquisa identificou por Transcriptoma que o gene CXCL8 foi diferencialmente expresso em leucócitos circulantes de pacientes afetados por DM2 descompensado+dislipidemia+Periodontite. O objetivo desse estudo clínico não-randomizado longitudinal é verificar em uma amostra independente de pacientes, se ocorrerá a replicação dos resultados observados anteriormente da expressão diferencial do gene CXCL8 em pacientes com DM2 e Periodontite. Além disso, pretendemos verificar como se comportam os níveis de mRNA de CXCL8 antes e depois de 90 dias do tratamento periodontal não-cirúrgico, e se estes se associam a parâmetros metabólicos glicêmicos, lipídicos e periodontais. Serão avaliados 100 indivíduos divididos em 5 grupos (com n=20 cada): DM2_Descomp_P (DM2 descompensados metabolicamente + P); DM2_Comp_P (DM2 compensados metabolicamente + P); DM2_sem_P (com DM2 e sem P); Periodontite (sem DM2 e com Periodontite moderada ou severa); e Controle (sem DM2 e sem P). Todos terão seu perfil glicêmico, lipídico e periodontal examinado por meio de exame de sangue (gratuito para o paciente) antes (zero) e depois de 90 dias de finalizado o tratamento periodontal não-cirúrgico. Os indivíduos dos grupos sem Periodontite receberão profilaxia e reforço da instrução de higiene oral nos mesmos períodos. Na ocasião da realização dos exames de sangue, uma alíquota será utilizada para separação de leucócitos para extração do RNA total. A expressão do gene CXCL8 será investigada por RT-qPCR (Transcriptase-Reversa seguida de Reação em Cadeia da Polimerase quantitativo em Tempo Real) pelo sistema TaqMan. Após normalização pelo controle endógeno, a expressão do gene CXCL8 será comparada entre todos grupos e períodos, e será analisada sua correlação com o perfil glicêmico, lipídico e periodontal dos indivíduos, além de regressões logísticas lineares e múltiplas. Cabe esclarecer que o presente projeto está incluído em um projeto maior que conta com o apoio da FAPESP e tem uma equipe de Pós-Graduandos e Docentes trabalhando na seleção dos participantes e nas sessões de manutenção, a qual já está em andamento. Ainda, o candidato à esta bolsa de Iniciação Científica já está voluntariamente auxiliando nas atividades clínicas. Portanto, o número de pacientes em cada grupo mostra-se factível para ser investigado neste projeto de IC. Os resultados do presente projeto irão complementar dados de outros projetos que estão sendo realizados pelo grupo de pesquisa e contribuirão para aumentar as evidências da inter-relação de DM2 e Periodontite, e compreender a interação da saúde sistêmica com a saúde oral.