Interação do biofilme multiespécie de Candida streptococcus na desmineralização dentária e na candidose oral

Resumo

A natureza polimicrobiana de biofilmes associados a doenças orais veem cada vez mais sendo reconhecida. Estes biofilmes, através de interações célula-a-célula, célula-substâncias poliméricas extracelulares, organização espacial e componentes bioquímicos e biofísicos, são capazes de modificar sua capacidade de virulência. Já se demonstrou que a interação Candida albicans-Streptococcus mutans, é capaz de aumentar a severidade das lesões de cárie dentária. Além disso, a interação C. albicans-S. gordonni aumenta a capacidade de invasão tecidual na candidíase oral. Porém, a interação simultânea no processo de desmineralização do esmalte dentário e na candidíase oral entre biofilmes multiespécie contendo C. albicans, S. mutans e S. gordonni ainda não foi avaliada. Cepas microbianas de C. albicans (SC5314), S. mutans (DL1) e S. gordonii serão utilizadas para formação de biofilme multiespécie em discos de hidroxiapatita revestido por saliva, esmalte dentário e em modelo de queratinócitos orais do tipo organ-on-chip. Microscopia de fluorescência por lapso de tempo será utilizada para avaliar as etapas de formação do biofilme. Microscopia de varredura por laser multifóton será utilizada para avaliar a arquitetura tridimensional do biofilme assim como, para verificar componentes microbianos e avaliação de proteínas relacionadas a integridade epitelial (E-caderina, N-caderina, Integrina). Método de contraste confocal não destrutivo, microscopia Raman confocal e espectrometria Raman serão utilizados para avaliação da capacidade de desmineralização do biofilme multiespécie. Será realizada a análise e quantificação dos polissacarídeos solúveis em água e em álcali. Análise do pH durante a formação do biofilme multiespécie e avaliação da expressão gênica por qRT-PCR de genes relacionados a virulência de C. albicans (ALS1, EAP1, PHR1, TUP, ECE1, CRZ1) será realizado. Testes de variância paramétrica e não paramétrica serão utilizadas para análises estatísticas (±=0,05). (AU)