Herança materna de anormalidades em mitocôndrias e retículo endoplasmático

Resumo

Evidências crescentes revelam que a obesidade materna predispõe a progênie a distúrbios cardiometabólicos. Neste contexto, estudos prévios apontam para um provável papel da disfunção mitocondrial e do retículo endoplasmático (ER) no oócito. Em paralelo, estudos em humanos e camundongos reportam que doenças metabólicas diminuem a expressão da mitofusina 2 (MFN2), impactando os sítios de contato mitocôndria-ER (MERCs) em tecidos como o músculo esquelético e o fígado. A MFN2 é um potente modulador do metabolismo mitocondrial e da sinalização por insulina, exercendo função-chave na regulação dos MERCs e da dinâmica mitocondrial. Anteriormente, nosso grupo observou que o nocaute oócito-específico da MFN2 resulta em progênie com intolerância a glicose, o que foi atrelado a reduzida insulinemia e sinalização deficiente por insulina no fígado e músculo esquelético. Ainda, este fenótipo se associou nos oócitos das progenitoras a alteração nos MERCs bem como disfunção mitocondrial e do ER. Dada a importância desses achados, no presente trabalho propomos investigar o impacto da obesidade materna e deleção oócito-específica da MFN2 sobre as mitocôndrias e o ER no músculo esquelético da progênie. Para tanto, fêmeas selvagens (WT) e com deleção oócito-específica da MFN2 (MFN2 KO) serão induzidas a obesidade por ingestão de dieta hiperlipídica (HFD). Como controle, fêmeas WT e MFN2 KO serão alimentadas com dieta normolipídica (NFD), perfazendo quatro grupos experimentais: WT-NFD, WT-HFD, MFN2 KO-NFD e MFN2 KO-HFD. As fêmeas serão acasaladas com machos WT e o músculo gastrocnêmio da progênie analisado por microscopia eletrônica de transmissão quanto a arquitetura de mitocôndrias e dos MERCs. Também será utilizado PCR quantitativo e western blotting para análise da abundância mitocondrial e expressão de fatores envolvidos na regulação da dinâmica mitocondrial e MERCs. Análises funcionais envolvendo a mitocôndrias serão realizadas a depender dos resultados obtidos. Esperamos com esse trabalho fornecer evidências de que a obesidade materna resulta em anormalidades em mitocôndrias e ER no músculo esquelético da progênie, possivelmente contribuindo com o desenvolvimento de doenças cardiometabólicas.