A dinâmica do ciclo celular de células progenitoras neurais entéricas no contexto da matriz extracelular

Resumo

O ciclo celular é tradicionalmente estudado por meio da sincronização das células em fases específicas do ciclo e por bulk biochemistry de células cultivadas como monocamadas bidimensionais. Entretanto, a proliferação celular numa população de células raramente é sincronizada e ocorre em microambientes tridimensionais dentro de organismos. O desenvolvimento de sondas fluorescentes para o estudo do ciclo celular e da microscopia 4D de alta velocidade tem superado estes obstáculos, permitindo videomicroscopia de longa duração de células assíncronas e ao nível de célula única em contextos fisiológicos. O trato gastrointestinal translúcido da larva do zebrafish, especialmente o sistema nervoso entérico (ENS) em desenvolvimento, é um excelente modelo para estudar a dinâmica do ciclo celular das células in vivo. O ENS é a maior e mais complexa porção do sistema nervoso periférico e é essencial para a função gastrointestinal. Anormalidades do desenvolvimento do ENS, como a Doença de Hirschsprung (HSCR), resultam em constipação crônica grave. Muitos estudos de HSCR reportaram expressão anormal de componentes de matriz extracelular (ECM). Apesar de pesquisas recentes terem revelado os principais fatores de transcrição e vias de sinalização que regulam o desenvolvimento da ENS, ainda não temos uma descrição do estado proliferativo das células progenitoras neurais entéricas (ENPs) enquanto migram ancoradas à ECM. Os objetivos específicos desta proposta são 1. analisar a dinâmica do ciclo celular, ao nível de célula única, de células ENP à medida que migram para dentro e ao longo do intestino do zebrafish em desenvolvimento e 2. investigar se a dinâmica do ciclo celular das células ENP migratórias está associado a mudanças na deposição e organização do colágeno e da laminina. A conclusão desses objetivos aumentará a nossa compreensão básica do desenvolvimento do ENS, com potencial para fundamentar estudos translacionais. (AU)