Regulação do receptor mTOR por rapamicina em camundongos de senescência acelerada: o papel da autofagia no processo de envelhecimento

Resumo

O envelhecimento é um processo natural e multifatorial caracterizado pela perda gradual da integridade fisiológica, prejudicando funções normais e essenciais a sobrevivência do corpo, e levando ao desenvolvimento de doenças relacionadas a idade, aumentando a vulnerabilidade à morte do organismo. Nesse contexto, a autofagia, um processo de degradação de conteúdo intracelular, regulado naturalmente pelo receptor sensor de nutrientes mammalian target of rapamycin (mTOR) ou quimicamente pelo fármaco rapamicina (RAPA), possui uma relação direta com a homeostasia celular e manutenção do fenótipo senescente. A senescência é um estado celular que contribui para o processo de envelhecimento, alterando metabolismo e funções da célula, causando danos locais e sistêmico ao longo do tempo, tanto a nível de tecidos e órgãos, quanto a nível de sistema imune e endócrino. Afim de entender melhor como alterações no metabolismo da glicose causadas pela indução da autofagia, devido a inibição do mTOR por RAPA, regulam o fenótipo senescente de linfócitos e impacta em tecidos e órgãos metabolicamente ativos, esse projeto busca investigar a relação entre o metabolismo da glicose e a autofagia, na regulação do fenótipo senescente de linfócitos, em camundongos Senescence-Accelerated Mouse Prone 8(SAM-P8) e Senescence-Accelerated-Resistant 1 Mouse (SAM-R1). Para tal serão avaliados: (1) mecanismo moleculares e celulares associados a senescência, como: alterações no perfil metabólico do sangue por fotometria, bem como alteração em marcadores genéticos por qPCR, no perfil de citocinas por ELISA, presença de apoptose na estrutura histológica por imunistoquimica, em amostras do musculo, pâncreas, baço e fígado, e alterações na população de linfócitos do sangue e baço por citometria de fluxo; (2) a relação entre a modulação da autofagia e o fenótipo senescência, através avaliação da sinalização de proteínas envolvidas na ativação da autofagia por Western blot; (3) alterações na sensibilidade e metabolismo da glicose, como: alterações na metabolização da glicose in vivo por teste de tolerância à insulina (ITT) e à glicose (GTT), e in vitro por metabolômica, na capacidade respiratória por seahorse, no número de mitocôndrias por qPCR, na produção de ROS por citometria de fluxo. (AU)