Análise comparativa do dual transcriptoma de macrófagos humanos infectados com parasitos Crithidia-like ou Leishmania

Resumo

A leishmaniose visceral humana (LV) é uma doença parasitária negligenciada causada pelo parasita Leishmania infantum no Brasil. Este protozoário é transmitido pela picada de fêmeas de flebotomíneos infectadas. A LV pode ser fatal se não tratada ou diagnosticada incorretamente. A LV é endêmica no Brasil, apresentando grande foco na região Nordeste, embora recentemente tenha se espalhado por várias regiões do país. Curiosamente, os relatos de casos de leishmaniose em coinfecção com tripanossomatídeo monoxênico têm aumentado a cada ano. Análises genômicas realizadas previamente por nosso grupo demonstraram que isolados clínicos de pacientes com LV internados no Hospital Universitário da Universidade Federal de Sergipe, Brasil, não pertencem a nenhuma espécie de Leishmania e são filogeneticamente relacionados à parasitas monoxênicos do gênero Crithidia, considerado não patogênico aos humanos. Denominamos esse parasita de Crithidia-like. Nesta proposta BEPE, nosso objetivo é avaliar em larga escala a diferença na expressão gênica em macrófagos de linhagem celular humana infectados com diferentes isolados de Crithidia spp. e Leishmania spp. por meio de sequenciamento de RNA (mRNA-seq). Até o momento não existem estudos do perfil do transcriptoma frente à infecção de parasitas tripanossomatídeos monoxênicos versus dixênicos. Para isto, trabalharemos em colaboração com o Dr. Jesus G. Valenzuela e o Dr. José M. Ribeiro, do Vector Molecular Biology Section of National Institute of Allergy and Infectious Diseases/National Institute of Health, USA. Os isolados clínicos foram obtidos de casos atípicos de LV (um fatal), nos quais as cepas do parasito foram isoladas de lesões de pele e aspirados de medula óssea. Neste contexto, através das análises de dual RNA-seq, poderemos identificar simultaneamente as alterações transcricionais que ocorrem tanto no hospedeiro quanto nos parasitas, resultando em um conjunto de dados que contribuirá para o entendimento da interação entre o hospedeiro e os parasitas durante a infecção intracelular. (AU)