Aplicação de peptídeos recombinantes selecionados por phage display como plataformas de biorreconhecimento em ensaios de fluxo lateral para o diagnóstico de câncer de mama

Resumo

O câncer de mama (CM), no Brasil, é o mais frequente entre as mulheres, depois do câncer de pele não melanoma. A origem da doença é complexa e envolve diversos fatores de risco, incluindo ambientais, biológicos e hereditários. A detecção precoce é crítica para um tratamento eficaz; entretanto, as estratégias diagnósticas atuais são limitadas. Assim, a busca por métodos mais precisos e sensíveis tornou-se o ponto de partida para diferentes abordagens científicas. A técnica de Phage Display permite a seleção de peptídeos recombinantes específicos para os mais diversos alvos moleculares, fornecendo moléculas versáteis. Em um estudo anterior, foi possível selecionar dois peptídeos chamados C3 e H2 que se ligam à superfície das células tumorais de mama. Os peptídeos selecionados, além de possuírem alta afinidade, pureza e baixo custo, podem ser utilizados no desenvolvimento de imunoensaios. Nesse sentido, este projeto visa caracterizar o perfil de reconhecimento desses peptídeos às proteínas do tumor mamário através do método de fluxo lateral. Para isso, o extrato de citoplasma e proteínas de membrana da linhagem mamária MCF-10A serão utilizados como controle negativo (não tumorigênico) e as linhas de tumor mamário MCF-7 (tumor com fenótipo luminal) e MDA-MB123 (tumor com fenótipo triplo-negativo) como controles positivos. Além disso, visando reduzir os custos de produção desse dispositivo analítico, nanopartículas de ouro serão sintetizadas e modificadas com estreptavidina, que será utilizada para interagir com os peptídeos para gerar a resposta colorimétrica. Após validação inicial, e otimização dos parâmetros de construção e análise, espera-se que os peptídeos C3 e H2 sejam eficientes na diferenciação das cepas, em ensaios de fluxo lateral. (AU)