Investigação das células-tronco derivadas da medula óssea na regeneração óssea e osseointegração de implantes dentários: estudo in vitro e pré-clínico em coelhos

Resumo

O objetivo desta pesquisa será investigar a osseointegração de implantes dentários com tratamento de superfície por nanoativação de hidroxiapatita (UNITITE® Compact, SIN Implantes, Brasil) biofuncionalizados com biovidro (BSF18, Vetra®) instalados em área de seio maxilar previamente enxertada com biomaterial sintético vidro bioativo (F18, Vetra®) associado com células-tronco derivadas da medula óssea (do Inglês, Bone Marrow Stromal Cells, BMSCs) ou com um biomaterial composto da mistura de hidroxiapatita e beta-fosfato tricálcio (HA², SinBone®, Portugal). Para testar as hipóteses, esse projeto será dividido em dois estudos. No primeiro estudo, as BMSCs serão obtidas da medula óssea das tíbias de 5 coelhos e submetidas ao isolamento e processamento celular in vitro. A análise da capacidade osteogênica será realizada através da diferenciação osteogênica, caracterização celular e diferenciação de células mesenquimais por meio do método de coloração por vermelho de alizarina e citometria de fluxo para determinar os marcadores de superfície celular. Após as BMSCs demonstrarem potencial osteogênico, as células serão plaqueadas e preparadas junto às partículas do biomaterial vidro bioativo (F18, Vetra®) para uso pré-clínico regenerativo de enxertia em defeitos criados no assoalho do seio maxilar dos coelhos. Uma análise de adesão e proliferação das BMSCs com partículas do F18® por imagens na MEV será investigada. No segundo estudo, um total de 40 coelhos será submetido a um acesso bilateral à membrana do assoalho do seio maxilar para realização de elevação desta e inserção de enxertos ósseos com os seguintes grupos: 1) SinBone®; 2) F18®; 3) F18®+SinBone®; 4) F18®+BMSCs; 5) coágulo. Uma membrana de colágeno absorvível será adaptada sobre a janela óssea em todos os grupos (Collagen Pericardium®, Bionnovation, Brasil). Após 30 e 60 dias, biópsias das áreas enxertadas e da membrana de colágeno absorvível serão coletadas e os defeitos enxertados serão submetidos à instalação de implantes de titânio (UNITITE®) associada ou não com uma biofuncionalização pelo biovidro BSF18 (Vetra®). Os animais serão eutanasiados após 15 dias da instalação dos implantes. Biópsias das áreas enxertadas serão analisadas por histometria descritiva e análise imuno-histoquímica das proteínas osteocalcina, BMP-2 e fosfatase alcalina. Áreas com implantes serão analisadas por microtomografia computadorizada e histometria para avaliar contato osso-implante (%BIC) e área de osso entre as roscas dos implantes (%BBT). A caracterização topográfica das superfícies dos implantes será investigada por imagens pela MEV, composição química por EDS, medidas do ângulo de contato e por microscópio de força atômica. (AU)