Caracterização biofísica do domínio CBD12 do trocador CALX1.2

Resumo

É conhecido que as duas isoformas do trocador CALX, CALX1.1 e CALX1.2, são diferentemente reguladas por Ca2+. As duas isoformas se diferenciam em uma pequena sequência de cinco aminoácidos na alça-FG do domínio CBD2. O modelo proposto para explicar a regulação do CALX por Ca2+ intracelular baseia-se no fato de que a ligação de Ca2+ em CBD12 altera a dinâmica entre os dois CBDs, o que gera uma tensão que seria transmitida ao domínio transmembranar. Portanto, a nossa hipótese é de que a dinâmica do domínio CBD12-1.1 é diferente da dinâmica do domínio CBD12-1.2, o que daria origem ao fenótipo diferente. Para testar essa hipótese propomos realizar medidas de relaxação de spins de 15N e RDCs para avaliar a dinâmica entre os dois CBDs nas construções CBD12 1.1 e 1.2. Esperamos que, ao contrário do que ocorre com a isoforma 1.1, a dinâmica da isoforma 1.2 não será significativamente alterada pela ligação de Ca2+.