Caracterização do papel de Nop17, membro do complexo R2TP, no sistema de montagem de proteínas Fe-S citosólicas (CIA) em Saccharomyces cerevisiae

Resumo

In vivo, a montagem de cluster Fe-S em apo-proteínas requer uma maquinaria biossintética complexa e conservada. Em eucariotos não fotossintetizantes, dois sistemas são dedicados a maturação de proteínas com cluster Fe-S, conhecidos como sistemas ISC (Iron-Sulphur Cluster Assembly) e CIA (Cytosolic Iron-Sulfur Protein Assembly). O sistema ISC ocorre dentro das mitocôndrias e é responsável pela maturação direta de todas as proteínas contendo clusters Fe-S dentro da organela e pela maturação indireta de todas as proteínas extra-mitocondriais contendo clusters Fe-S, por meio da exportação de um composto desconhecido contanto enxofre (X-S). O sistema CIA ocorre no citosol e depende do composto X-S para maturar todas as proteínas citosólicas e nucleares contendo Fe-S. Nosso laboratório identificou uma interação entre Dre2, proteína do sistema CIA, e Pih1/Nop17, membro do complexo cochaperona R2TP. Outros trabalhos também mostraram a interação entre Hsp90 e outras proteínas de CIA. O complexo R2TP-Hsp90 matura uma grande variedade de proteínas e complexos, como snoRNPs de box C/D e a RNA polimerase II. A interação tanto de Nop17 quanto de Hsp90 com proteínas de CIA sugere a participação do complexo R2TP-Hsp90 neste sistema. Experimentos anteriores em nosso laboratório também indicaram a presença de um cluster [4Fe-4S] em Nop17. Neste projeto, propomos a caracterização do papel do complexo R2TP no sistema CIA, bem como a caracterização estrutural do cluster Fe-S de Nop17. (AU)