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Análise funcional da deleção de PIMREG em células repórter para reparo de dano no DNA

Processo: 21/06194-8
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de setembro de 2021
Vigência (Término): 31 de agosto de 2022
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Genética - Genética Humana e Médica
Pesquisador responsável:Leticia Fröhlich Archangelo
Beneficiário:Maria Vitória de Rizzo Gasparini
Instituição-sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
Assunto(s):Genética médica   Quimioterápicos   Dano ao DNA   Transformação celular neoplásica   Células tumorais   Recombinação homóloga   Glioblastoma   Análise funcional

Resumo

PIMREG (PICALM interacting mitotic regulator) é uma proteína localizada majoritariamente no núcleo e enriquecida no nucléolo, sendo um substrato do complexo promotor da anáfase/ciclossomo (APC/C), que controla a transição da metáfase para a anáfase. Embora sua função na carcinogênese ainda seja pouco conhecida, sabe-se que essa proteína está presente em diversos tipos de câncer, sendo a expressão mais elevada em glioblastoma. Dados recentes do grupo sugerem que PIMREG pode estar relacionada à sinalização de resposta a dano e reparo do DNA, já que foi visto um aumento de seus níveis proteicos em células de glioblastoma submetidas ao estresse replicativo induzido por quimioterápicos. Buscando compreender a função de PIMREG na sinalização da via de dano e reparo de DNA, será feito o nocaute do gene, por meio do sistema CRISPR/Cas9 (plasmídeo PX458), em células da linhagem U2OS que apresentam um sistema repórter para reparo do DNA por meio de HR (homologous recombination). Estas células serão utilizadas em ensaios que visam identificar o envolvimento da proteína de interesse no reparo de quebra de dupla fita do DNA. Com a maior compreensão da função de PIMREG no reparo de dano de DNA, espera-se elucidar possíveis mecanismos de resistência de células tumorais frente ao tratamento quimioterápico e radioterápico. (AU)

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