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Avaliação de possíveis ligantes do vírus RSV na estrutura proteica das armadilhas extracelulares dos neutrófilos (NETs)

Processo: 21/05107-4
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de agosto de 2021
Vigência (Término): 31 de julho de 2022
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Celular
Pesquisador responsável:Karina Alves de Toledo
Beneficiário:Leonardo da Silva Pinto
Instituição-sede: Faculdade de Ciências e Letras (FCL-ASSIS). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Assis. Assis , SP, Brasil
Assunto(s):Imunidade inata   Vírus sincicial respiratório humano   Neutrófilos   Eletroforese   Immunoblotting

Resumo

O Vírus Sincicial Respiratório (hRSV) é o principal agente etiológico das infecções virais agudas do trato respiratório inferior, contra o qual ainda não existe tratamento específico ou vacina aprovados. No tecido pulmonar do paciente infectado, há um intenso acúmulo de neutrófilos. Na presença sustentada de estímulos externos (microorganismos, parasitas e mediadores inflamatórios), neutrófilos ativados secretam seu conteúdo nuclear, carregando consigo material citoplasmático e granular. A estrutura extracelular gerada é denominada "Neutrophil Extracellular Traps" ou NETs, as quais apresentam funções microbicidas, capturando e/ou inativando bactérias, vírus, fungos e parasitas. Estudos recentes demonstram que o hRSV é capaz de induzir a formação das NETs através da sua proteína F. O excesso de NETs, debris celulares e muco decorrentes da infecção por hRSV, formam um muco consistente de difícil expectoração que se acumula no lúmen dos bronquíolos, restringindo drasticamente o fluxo de ar, agravando o quadro clínico do paciente. Foi demonstrado que as NETs interagem com as partículas virais do hRSV e, dados recentes do nosso grupo indicam que este contato resulta em ação virucida destas estruturas. Atualmente, através de Projeto Regular FAPESP aprovado (processo número 2018/09021-4), nosso grupo tem interesse em investigar a interação das NETs com o hRSV, e detalhar as consequências destas interações no curso da infecção viral. O presente projeto se insere neste contexto, ao propor um estudo de iniciação científica que objetiva avaliar possíveis ligantes do vírus RSV na estrutura das NETs. Para tanto, serão realizados ensaios de imunoblotting, incubando amostras do vírus com membranas de nitrocelulose contendo NETs impregnadas após eletroforese. Num segundo momento, amostras imunoprecipitadas após incubação de NETs com RSV serão submetidas a eletroforese. Em ambos os casos, a realização dos ensaios será auxiliada pelo uso do anticorpo Palivizumab, específico para a proteina F viral. Os dados gerados neste estudo, em complemento com aqueles obtidos no projeto regular aprovado, poderão direcionar novas estratégias no tratamento de pacientes com hRSV, desde a melhora na qualidade respiratória quanto no bloqueio da disseminação viral. (AU)

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