Investigação do perfil de células T CD4+ e T CD8+ utilizando a citometria multidimensional na busca de biomarcadores na tuberculose latente

Resumo

A Organização Mundial da Saúde estabeleceu metas para eliminação da epidemia da tuberculose (TB) até 2035. A tuberculose é uma doença infecto contagiosa de transmissão aérea, com acometimento principalmente pulmonar e pode afetar outros órgãos. A TB é uma doença tratável se diagnostica adequadamente. Para enfrentamento da TB é essencial buscar estratégias para detecção precoce e tratamento da doença nas fases de maior transmissibilidade. Existem muitas dificuldades no enfrentamento da TB, entre elas a multiresistência do bacilo, co-infecção tuberculose-HIV, diabetes, confinamento de pessoas (sistemas prisionais), pobreza, desnutrição e, principalmente, a dificuldade de diagnosticar pacientes com TB latente. Para diagnóstico da TB ativa (pulmonar) há exames diagnósticos que incluem a anamnese do paciente, exames de imagem e testes laboratoriais microbiológicos. Por outro lado, a TB latente é assintomática, mas pode ser diagnosticada laboratorialmente utilizando testes que mensuram a imunidade celular específica na TB, como o teste tuberculínico e os ensaios de liberação de IFN-g (IGRA, Interferon Gama Release Assay). Estes ensaios são amplamente utilizados em programas de políticas públicas que visam eliminação da epidemia da TB. O Quantiferon-TB-Gold é o sistema utilizado mais amplamente utilizado para detecção de TB latente, e é composto por tubos de coleta de sangue contendo ou não antígenos recombinantes de M. tuberculosis para estimulação de células T. Há situações que o QuantiFERON-TB-Gold não diagnostica a resposta específica por diminuição da imunidade do indivíduo, assim a busca por outros biomarcadores, solúveis e celulares é atual. Diversos biomarcadores são descritos na caracterizaçãoda TB latente, porém as metodologias de mensuração e ensaios funcionais imunológicos diferem de laboratório para laboratório, quanto ao uso de reagentes, desenho do ensaio, faltando uma padronização universal para comparação de resultados de forma mais efetiva. Em nosso laboratório, propomos utilizar metodologias universais sugeridas por laboratórios nacionais e internacionais que avaliam resposta imune a M. tuberculosis, seja para diagnosticar a TB latente ou para avaliar a imunogenicidade de candidatos vacinais. Para tanto propomos a padronização da estimulação de células com antígenos imunodominantes e estabelecidos pela comunidade científica internacional e painéis universais para imunofenotipagem de células imunes. Neste projeto caracterizaremos o fenótipo de células T CD4+ e T CD8+ em relação a ativação, memória, perfil Th e exaustão estimuladas com os antígenos contidos no sistema Quantiferon-TB-Gold-Plus. Esta caracterização minuciosa de biomarcadores nas células coletadas com o sistema IGRA auxiliará na caracterização dos casos de TB latente, que segundo recomendações do Ministério da Saúde, precisam ser tratados para evitar a ativação e transmissão da TB. (AU)