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Biopsia simultânea e perfil lipídico da massa celular interna e trofectoderma embrionário

Processo: 19/17796-9
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Doutorado
Vigência (Início): 01 de junho de 2021
Vigência (Término): 30 de setembro de 2023
Área do conhecimento:Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
Pesquisador responsável:Mateus José Sudano
Beneficiário:Thamiris Vieira Marsico
Instituição Sede: Centro de Ciências Naturais e Humanas (CCNH). Universidade Federal do ABC (UFABC). Ministério da Educação (Brasil). Santo André , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:18/21496-8 - Caminhos para prenhez embrionária, AP.JP
Bolsa(s) vinculada(s):22/13551-4 - Biópsia simultânea e perfil lipídico da massa celular interna e trofectoderma embrionário, BE.EP.DR
Assunto(s):Embrião   Bovinos   Biópsia   Perfil lipídico   Massa celular interna do blastocisto   Técnicas de maturação in vitro de oócitos   Fertilização in vitro   Diferenciação celular
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:bovinos | competência embrionária | diferenciação | embrião | espectrometria de massa | Lipidômica | Tecnologia de Embriões

Resumo

O objetivo do presente projeto é o estabelecimento da biopsia simultânea e do perfil lipídico da Massa Celular Interna (MCI) e Trofoectoderma (TE) Embrionário. Para tanto, ovário de abatedouro serão utilizados para obtenção de oóctios de qualidade, os quais serão submetidos a maturação in vitro, e fertilização in vitro (D0). Os possíveis zigotos serão cultivados in vitro para produção dos embriões. Experimento I: blastocistos expandidos D7 (n=45/grupo) serão submetidos ou não ao procedimento de biopsia das células da MCI e TE. As biopsias serão adequadamente armazenadas para posterior avaliação (imunolocalização de proteínas e perfil lipídico-MRM) e retornarão para o cultivo para o monitoramento do desenvolvimento, distribuídos da seguinte maneira: grupo 1: Bx que sofreram biopsia da MCI e TE; Grupo 2: Bx que sofreram biopsia apenas da TE; Grupo 3: Bx que não sofreram biopsia. Após 12 horas, será realizada uma análise morfológica e avaliada a taxa de re-expansão dos blastocistos biopsados (grupos 1 e 2) seguido da investigação de apoptose (TUNEL) e imunolocalização de proteínas (CDX2, GATA6 e NANOG) de todos os blastocistos (grupos 1 a 3) para avaliar o impacto das biopsias (simultânea MCI e TE, e biopsia apenas da TE) sobre o desenvolvimento, apoptose e diferenciação das diferentes linhagens celulares (trofoectoderma, epiblasto e hipoblasto). Experimento II: as células da MCI e TE biopsadas (n=15, Grupos 1 e 2) serão utilizadas para caracterização proteica da MCI e TE através da investigação da proteína CDX2. Experimento III: as biopsias da MCI e TE (grupos 1 e 2) serão agrupadas em pools de 3 biopsias por réplica (n=5 réplicas/ grupo) e submetidas a análise do perfil lipídico pelo monitoramento de reações múltiplas (perfil-MRM) em laboratório de facilidades ômicas. Para análise estatística, modelo uni e multivariados de dados serão utilizados com o auxílio de softwares estatísticos robustos capazes de avaliar uma grande quantidade de dados e fornecer respostas contundentes as hipóteses testadas. Será adotado o nível de significância de 5% (P<0,05). (AU)

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Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
MARSICO, THAMIRIS VIEIRA; VALENTE, RONIELE SANTANA; ANNES, KELLY; OLIVEIRA, ANDRESSA MINOZZO; SILVA, MARA VIANA; SUDANO, MATEUS JOSE. Species-specific molecular differentiation of embryonic inner cell mass and trophectoderm: A systematic review. Animal Reproduction Science, v. 252, p. 11-pg., . (19/17796-9, 18/21496-8, 20/08826-9, 22/02139-5, 19/18415-9)
MARSICO, THAMIRIS VIEIRA; SILVA, MARA VIANA; VALENTE, RONIELE SANTANA; ANNES, KELLY; RISSI, VITOR BRAGA; GLANZNER, WERNER GIEHL; SUDANO, MATEUS JOSE. Unraveling the Consequences of Oxygen Imbalance on Early Embryo Development: Exploring Mitigation Strategies. ANIMALS, v. 13, n. 13, p. 18-pg., . (19/17796-9, 18/21496-8, 19/18415-9, 20/08826-9)
VALENTE, RONIELE SANTANA; MARSICO, THAMIRIS VIEIRA; SUDANO, MATEUS JOSE. Basic and applied features in the cryopreservation progress of bovine embryos. Animal Reproduction Science, v. 239, p. 8-pg., . (18/21496-8, 19/17796-9, 19/18415-9)

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