Capacitação em técnicas para cuidado, manutenção e reprodução de linhagens transgênicas de camundongos Cre-LoxP

Resumo

O objetivo do projeto é capacitar o bolsista para manutenção de camundongos transgênicos, e de técnicas laboratoriais, como extração de DNA, reação de PCR e eletroforese em gel de agarose. Duas tarefas específicas e complementares serão de responsabilidade do bolsista: (i) capacitação sobre normas de segurança e cuidados na manipulação de animais; (ii) genotipagem dos animais.Plano de trabalho: O bolsista será responsável por manter o biotério nas condições ideais (segundo as normas do comitê de ética) de limpeza, iluminação e umidade, além dos cuidados com os animais: distribuição e limpeza das caixas, manutenção de água e comida, reprodução e sexagem. Será estabelecida uma rotina onde as tarefas acima descritas serão distribuídas durante a semana. Inicialmente o bolsista receberá treinamento e capacitação inicial sobre as normas de biossegurança do laboratório e sobre o uso e manipulação de animais de experimentação.Genotipagem: O bolsista será responsável pelo cruzamento de camundongos transgênicos (formação de casais e troca das caixas), coleta de amostras, extração de DNA, reação de PCR e eletroforese em gel de agarose. Após a realização de todas essas etapas, será possível a identificação do genótipo dos animais transgênicos. Tarefas como: preparo de soluções, processamento de tecidos coletados para a realização de diversas, além de participar das discussões científicas do laboratório, também farão parte da rotina do bolsista.Justificativa: Recebemos doação de algumas linhagens de camundongos transgênicos que serão essenciais para o projeto Jovem Pesquisador. O Dr. Carsten T Wotjak, do Instituto Max Planck de Psiquiatria de Munique, nos doou as linhagens TRPV1ff, Camk-CB1, CB1ff e CB1 KO. Estes animais nos permitirão investigar a contribuição dos receptores CB1 e TRPV1 de diferentes populações celulares, em diferentes estruturas, na modulação de respostas comportamentais ao estresse. A bolsa de TT-3 será importante para o cuidado e manutenção do biotério e dos animais, parte essencial para o andamento de todas as outras etapas dos projetos.