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Avaliação do efeito da terapia fotodinâmica antimicrobiana associada a DNAse no tratamento de Candidose Oral em camundongos infectados com Candida albicans

Processo: 19/27634-6
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Doutorado
Vigência (Início): 01 de dezembro de 2020
Vigência (Término): 31 de janeiro de 2024
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada
Pesquisador responsável:Ana Cláudia Pavarina
Beneficiário:Cláudia Carolina Jordão
Instituição Sede: Faculdade de Odontologia (FOAr). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:13/07276-1 - CEPOF - Centro de Pesquisa em Óptica e Fotônica, AP.CEPID
Assunto(s):Prótese parcial removível   Desoxirribonucleases   Candidose   Candida albicans   Enzimas hidrolíticas   Fluconazol   Terapia fotodinâmica antimicrobiana   Modelos animais
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Cândida Albicans | enzimas hidrolíticas | Terapia Fotodinâmica Antimicrobiana | Prótese Parcial Removível

Resumo

O objetivo do estudo será avaliar a eficácia da terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT) associada a enzima DNase (DNase I) no tratamento de Candidose Oral induzida em camundongos infectados com cepas de Candida albicans susceptível e resistente a fluconazol. Camundongos fêmeas (Swiss) com aproximadamente 5 semanas de vida serão imunossuprimidos e inoculados com C. albicans (107 UFC/mL). Após o estabelecimento da infecção, os animais serão submetidos aos tratamentos por 5 dias consecutivos. Os animais do grupo aPDT (P+L+) serão tratados utilizando Photodithazine (PDZ) 200 mg/L associado à luz LED de 50 J/cm2; no grupo (P+L-) será utilizado apenas o PDZ, sendo que os animais do grupo (P-L+) serão tratados apenas luz LED. Nos animais do grupo DNase a enzima será aplicada por 5 minutos. Também será avaliada a combinação das terapias (DNAse/P+L+). Um grupo será apenas inoculado com C. albicans (grupo P-L-) e outro será constituído de animais saudáveis (grupo CNI). Após os tratamentos, será realizada a recuperação de C. albicans por meio da fricção de swabs estéreis. Então diluições seriadas serão realizadas e plaqueadas em placas de Petri com Ágar Sabouraud Dextrose (SDA). Após 48 horas de incubação a 37°C, as colônias serão quantificadas e o número de UFC/mL será determinado. Os camundongos serão sacrificados 24 horas e 7 dias após os tratamentos. Além da avaliação microbiológica, será realizada a análise macroscópica e histológica das lesões. Será também analisada a resposta imune do hospedeiro (IL-6, IL-10, MCP-1, IFN-³, TNF, proteína IL-12p-70) em citometria de fluxo e expressão de ²-defensina (mBD1 e mBD2) via RT-qPCR. Técnicas de microscopia confocal a laser serão utilizadas para marcação de estrutura 3D de componentes da matriz do biofilme. Para complementar essas análises, será avaliada a expressão de genes relacionados com a matriz extracelular (BGL2 e PHR1), estresse oxidativo (SOD1) e adesão ao substrato do hospedeiro (EFG1 e HWP1). Os resultados serão analisados pelo método estatístico mais apropriado. (AU)

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Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
FERRISSE, TULIO MORANDIN; DIAS, LUANA MENDONCA; DE OLIVEIRA, ANALU BARROS; JORDAO, CLAUDIA CAROLINA; DE OLIVEIRA MIMA, EWERTON GARCIA; PAVARINA, ANA CLAUDIA. Efficacy of Antimicrobial Photodynamic Therapy Mediated by Photosensitizers Conjugated with Inorganic Nanoparticles: Systematic Review and Meta-Analysis. PHARMACEUTICS, v. 14, n. 10, p. 18-pg., . (19/27634-6, 20/07110-0, 20/16227-8, 21/01191-0, 13/07276-1)
DIAS, LUANA MENDONCA; KLEIN, MARLISE INEZ; FERRISSE, TULIO MORANDIN; MEDEIROS, KARINE SOUSA; JORDAO, CLAUDIA CAROLINA; BELLINI, AMANDA; PAVARINA, ANA CLAUDIA. The Effect of Sub-Lethal Successive Applications of Photodynamic Therapy on Candida albicans Biofilm Depends on the Photosensitizer. JOURNAL OF FUNGI, v. 9, n. 1, p. 22-pg., . (18/14874-6, 19/27634-6, 21/01191-0, 13/07276-1)
DE SOUSA, TABATA VIANA; JORDAO, CLAUDIA CAROLINA; AUGUSTO ABREU-PEREIRA, CESAR; PEREIRA, ANA LUIZA GORAYB; BARBUGLI, PAULA ABOUD; KLEIN, MARLISE INEZ; PAVARINA, ANA CLAUDIA. Hydrogen peroxide enhances the efficacy of photodynamic therapy against Candida albicans biofilms. BIOFOULING, v. 39, n. 1, p. 16-pg., . (20/09332-0, 19/27634-6, 13/07276-1)

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