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O potencial biomarcador da proteína ELSPBP1 em espermatozóides com alta fragmentação de DNA

Processo: 19/26338-4
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de abril de 2020
Vigência (Término): 31 de maio de 2021
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Medicina - Cirurgia
Pesquisador responsável:Ricardo Pimenta Bertolla
Beneficiário:Ana Carolina Cardillo Fernandes
Instituição-sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Etiologia   Reprodução humana   DNA   Infertilidade masculina   Espermatozoides   Biomarcadores   Imuno-histoquímica   Coeficiente de correlação de Pearson

Resumo

A infertilidade é um problema conjugal que atinge 15% dos casais em idade reprodutiva,no qual o fator masculino está presente em 50% dos casos. A etiologia do problema decorre dediversos fatores, como por doenças ou por estilo de vida. Apesar da análise seminal ser utilizada como método para avaliação do potencial fértil masculino, esta apresenta baixa correlação com a fertilidade, tendo baixo poder preditivo no diagnóstico de infertilidade de um paciente. Dessa forma, testes funcionais foram criados para avaliar a fundo as alterações dos espermatozoides, dentre eles pode-se destacar a análise da fragmentação do DNA dos espermatozoides. A fragmentação de DNA pode decorrer de três formas, dentre elas por apoptose. Estudos anteriores do grupo encontraram proteínas hiperexpressas em amostras com altos níveis de fragmentação deDNA dos espermatozoides, sendo que algumas dessas apresentavam relação com apoptose.Ainda, a proteína ELSPBP1 (Epididymal sperm-binding protein 1) também foi hiperexpressanessas amostras. Foi demonstrado que, em bovinos, essa proteína se liga a espermatozoides e pode auxiliar na seleção de espermatozoides nos epidídimos. Hipotetizamos, assim, que os espermatozoides ejaculados que apresentam fragmentação em seu DNA expressam em sua membrana tanto a proteína Fas, demonstrando a marcação para que esse espermatozoide sofraapoptose, quanto a proteína ELSPBP1, demonstrando sua marcação como um espermatozoide alterado. Portanto, o objetivo deste estudo é avaliar a correlação entre a expressão de Fas e de ELSPBP1 e a fragmentação do DNA dos espermatozoides. Para isso, amostras seminais de 50 homens com concentração espermática igual ou superior a 15 milhões de espermatozoides/mLserão utilizadas. Nessas, serão avaliadas a fragmentação de DNA dos espermatozoides, peloensaio TUNEL (Terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nich-end labeling), e a presença das proteínas Fas e ELSPBP1 em espermatozoides, por imunocitoquímica. Os dados serão analisados por teste de correlação de Pearson ou teste de correlação de Spearman, dependendo da normalidade da distribuição das variáveis. Para verificar se os dados são significativos, será utilizado o índice Cohen. Um erro alfa de 5% será adotado para todas as análises. (AU)

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