Engenharia de circuitos genéticos em Saccharomyces cerevisiae

Resumo

Drogas dirigidas ao sistema nervoso central frequentemente falham em testes clínicos devido ao transporte ineficaz para o cérebro, especificamente, devido à importação ineficiente de drogas através da barreira hematoencefálica. Neste projeto, pretendemos usar a levedura Saccharomyces cerevisiae como hospedeira para expressar proteínas de transmembrana da barreira hematoencefálica humana. Construiremos linhagens de levedura onde a via de síntese nativa do ergosterol é alterada para promover a indução capaz de alternar entre a via nativa de síntese de esterol da levedura e uma via sintética humana. Vamos projetar um conjunto de promotores sintéticos combinatórios para controlar as vias de síntese do colesterol, a fim de avaliar a dosagem ótima de cada gene para promover a incorporação ótima de transportadores humanos à membrana plasmática. Linhagens de levedura com membrana plasmática humana mimética serão empregadas como hospedeiros para a expressão heteróloga de várias proteínas transmembrana humanas para estudos funcionais, o que pode auxiliar no desenho racional de drogas direcionadas ao sistema nervoso central. (AU)