Caracterização de um possível mecanismo de regulação pós- traducional na função da proteína adaptadora Dpb11 durante a resposta ao dano de DNA em Saccharomyces cerevisiae

Resumo

A proteína Dpb11 (TopBP1 em humanos) é uma proteína essencial para a viabilidade celular atuando em processos celulares como replicação, sinalização/reparo e recombinação do DNA. Como parte da resposta ao dano de DNA, Dpb11 exerce um papel regulatório central na via de checkpoint de dano ao DNA através da interação de seus domínios BRCT (BRCA1 C-terminal domain) com diferentes proteínas fosforiladas, estabelecendo assim complexos proteicos transientes que são recrutados para regiões de dano no DNA. A sinalização de checkpoint é um sofisticado mecanismo de monitoramento celular capaz de reconhecer lesões no DNA e promover uma via de transdução e amplificação do sinal com o intuito de proteger a célula do acúmulo de instabilidade genômica. Resultados proteômicos mostraram que a quinase de checkpoint Rad53 (CHK1/CHK2 em humanos) fosforila extensivamente Dpb11 durante o estresse de replicação induzido por MMS (metanossulfonato de metila), entretanto, nada se sabe sobre o efeito dessas fosforilações na função proteica de Dpb11 como, por exemplo, na sua interação com diferentes ligantes durante a resposta ao dano de DNA. Sendo assim, esse projeto de pesquisa tem como objetivo analisar o impacto da fosforilação de Rad53 na função proteica de Dpb11 durante o estresse de replicação.