Interação parácrina mediada por vesículas extracelulares entre as células mesangiais e endoteliais em hipóxia e sua contribuição para fibrose

Resumo

Na doença renal crônica é observada tanto a injúria túbulo-intersticial quanto a esclerose glomerular. Enquanto o papel da hipóxia na fibrose túbulo-intersticial é muito estudado, na lesão glomerular é menos avaliado. As células endoteliais interagem com as células mesangiais no glomérulo, células estas produtoras de matriz extracelular. Esta interação, principalmente em condições lesivas como na hipóxia, pode ocorrer vias vesículas extracelulares. O objetivo deste trabalho é analisar a comunicação in vitro entre células endoteliais e mesangiais através de vesículas extracelulares em condições de hipóxia e avaliar a função das células mesangiais nestas condições, como proliferação e síntese de proteínas de matriz extracelular. Células endoteliais humanas (HUVEC) serão submetidos a hipóxia (1% O₂, 5% CO₂) e normóxia (21% O₂ e 5% CO₂) durante 48h. Exossomos (50 µg/ml) serão extraídos para caracterização e utilização no tratamento das células endoteliais durante 48h. Nossos resultados preliminares mostraram que os exossomos extraídos meio de cultura em normóxia, mostraram moda de 139 nm e concentração de 9,5 1010 partículas/ml, condizente com exossomos. A análise por western blot mostrou que vesículas extracelulares expressaram marcadores específicos de exossomos como CD63 e CD81. Adicionalmente, a dosagem de lactato no meio de cultura mostrou que as células em hipóxia produziram mais lactato que as células em normóxia, condizente com as condições de baixa pressão de O₂. Resultados posteriores são necessários para avaliar a interação entre as células endoteliais e mesangiais por meio dos exossomos.