Avaliação do gene HIF1-a em células-tronco tumorais de Câncer Cabeça e Pescoço

Resumo

O câncer de cabeça e pescoço (CCP) é uma classe heterogênea de tumores por afetar diversas regiões como boca, laringe, nasofaringe e tireoide, e por isso, torna-se difícil o diagnóstico precoce e prognóstico da doença. Mesmo com os avanços no tratamento a taxa de sobrevida para este tipo de câncer ainda é baixa devido à recidiva tumoral e a formação de metástases. Uma explicação para estes eventos é a presença de uma população de células tronco-tumorais (CTT), que são resistentes a quimio e radioterapia, fazendo com que o tumor reapareça. As CTTs são caracterizadas por sua capacidade de auto renovação, proliferação descontrolada e capacidade metastática. A angiogênese é um dos principais processos envolvidos no desenvolvimento do câncer e surgimento da metástase, pois fornecem nutrientes e oxigênio para o crescimento tumoral. Em vista disto, é importante identificar biomarcadores angiogênicos que podem auxiliar no diagnóstico precoce do câncer e na elaboração de estratégias de prevenção. Para isso, o presente projeto tem por objetivos identificar células troncos tumorais em duas linhagens celulares de CCP e avaliar a expressão gênica e proteica do gene HIF-1± em células tronco tumorais de câncer de cabeça e pescoço. As linhagens celulares HEP-2 - carcinoma de laringe e HN13- carcinoma de cavidade oral serão colocadas em cultivo e então separadas em CTTs+ e CTTs- por citometria de fluxo, também serão feitos os testes de cultivo de colônias de esferas tumorais, ensaio do potencial de invasão e ensaio de proliferação celular. Após a separação, serão realizados a extração de RNA, RT-PCR e análise da expressão gênica e dosagem proteica. Os dados obtidos serão tratados estatisticamente. Espera-se encontrar expressão alterada do gene HIF-1± associada com a alteração na concentração da proteína sintetizada por este gene em células tronco-tumorais e comparar com células não tronco-tumorais de carcinoma espinocelular de cabeça e pescoço.