Proteoglicanos de sulfato de heparano como reguladores do tônus vascular

Resumo

O glicocálice é conhecido como regulador da atividade da eNOS e, portanto, um regulador da produção de NO. Fizemos a descoberta inédita de que animais knockout para glypican-1 e syndecan-1, componentes do glicocálice, têm vasodilatação e vasoconstrição dependentes do endotélio prejudicados. Estes efeitos são mais significantes no animal knockout para glypican-1 (Gpc-1 -/-) quando comparado ao knockout de syndecan-1 (Sdc-1 -/-) e, portanto, a nossa hipótese é que o glypican-1 (Gpc-1) é o principal proteoglicano atuando como um modulador de tônus vascular. Além disso, a ausência de Gpc-1 e Scd-1 altera a dinâmica do cálcio nas células vasculares por mecanismos desconhecidos. Desta maneira, buscamos avaliar a contribuição relativa de Gpc-1 e Sdc-1 para a regulação do tônus vascular e buscar os mecanismos que resultam em alterações na dinâmica do cálcio em células vasculares resultando em vasoconstrição prejudicada. Vamos explorar como a vasoconstrição prejudicada pode estar relacionada ao controle da pressão arterial nesses camundongos knockout. Serão utilizados neste estudo camundongos knockout de Syndecan-1 (Sdc-1 -/-), knockout de Glypican-1 (Gpc-1 -/-) e seus controles (CD1 será usado como controle para Gpc-1 -/- e C57BL6 será usado como controle para Sdc-1 -/-). Vamos promover o silenciamento de Gpc-1 nos anéis aórticos de Sdc-1 -/-, silenciar Sdc-1 nos anéis aórticos de Gpc-1 -/- e resgatar a expressão de Gpc-1 e Sdc-1 nos anéis aórticos do knockout globais. Vamos realizar experimentos de reatividade vascular e avaliar a resposta miogênica através de miógrafo pressurizado. Além disso, a fluorescência de cálcio será avaliada em células isoladas de anéis aórticos por meio de microscopia confocal.