Identificação global de alvos do miR-155 em células musculares esqueléticas

Resumo

Doenças musculares são alterações no tecido muscular esquelético causadas por diversas proteínas estruturais defeituosas, vias moleculares desreguladas e outros mecanismos. Diversos grupos de pesquisa estudam essas alterações musculares a fim de esclarecer todos os processos responsáveis por essa condição que modificam a musculatura esquelética e leva à uma degeneração progressiva letal desse tecido. A complexidade dos mecanismos de controle da expressão gênica nesse processo sugere o envolvimento de moléculas reguladoras adicionais, como os microRNAs; essas moléculas de pequenos RNAs codificadas pelo genoma regulam vários processos celulares do músculo esquelético, remodelando molecularmente o perfil proteômico global, através de regulações diretas do mRNA alvo e/ou alterações epitranscricionais via fatores transcricionais quinases, fosfatases e assim por diante. Os microRNAs trabalham de forma orquestrada para controlar uma função biológica comum; essa característica única dos microRNAs os tornam ferramentas eficientes para determinação de vias específicas envolvidas em diversas condições, incluindo doenças musculares. Estudos que analisaram a expressão global de microRNAs em tecido muscular, identificaram o miR-155 desregulado em várias doenças musculares, sendo sugerido como um potencial microRNA envolvido nas alterações moleculares que acometem a musculatura esquelética desses pacientes. Sendo assim, a hipótese do presente trabalho é que o miR-155 possui alvos diretos, e também, atua na regulação de fatores transcricionais que alteram molecularmente as células musculares esqueléticas. O objetivo desse trabalho será identificar os alvos diretos e indiretos (alvos alterados por regulação epitranscricional), utilizando dados de RNA-seq e ferramentas de predição como miRWalk e miRTarBase, e analisar a alteração morfológica dessas células por imunofluorescência. A caracterização do perfil de mRNAs regulados pelo miR-155 poderá desvendar as vias de sinalização biológica, potencialmente direcionadas por esse microRNA, e contribuirá para a identificação de possíveis alvos terapêuticos e tratamentos para pacientes com tais desordens musculares.