Cinética de oxidação da hemoglobina extracelular gigante de A. gracilis (HbAg) em função da temperatura e na presença de agentes caotrópicos

Resumo

O plano de atividades proposto está totalmente vinculado ao projeto de pesquisa, na categoria de jovem pesquisador (2015/11447-1) que tem como objetivo realizar estudos de caracterização estrutural e da estabilidade da hemoglobina extracelular gigante extraída do anelídeo Amynthas gracilis (HbAg) e avaliar o seu potencial uso como biossensor de contaminação ambiental. Neste projeto estudos relacionados com as propriedades biofísicas da HbAg, tais como, a estabilidade térmica, a dissociação e/ou desnaturação, em diferentes valores de pH, mudanças estruturais na presença de agentes caotrópicos, além de das interações da HbAg com metais e pesticidas estão sendo realizados. Várias técnicas espectroscópicas, tais como, absorção ótica, fluorescência estática, dicroísmo circular, espalhamento dinâmico de luz (DLS), e estruturais, espalhamento de raios X a baixo ângulo (SAXS), ultracentrifugação analítica (AUC) e espectrometria de massas MALDI-TOF-MS e absorção atômica são utilizadas. Uma vez caracterizada, a HbAg será imobilizada em superfícies sólidas através da preparação de filmes automontados e seu potencial como biossensor para a detecção de metais/pesticidas. No plano de atividades proposto para a bolsa TT3 será realizado estudos de cinética de oxidação, por absorção ótica, da HbAg em função do pH, concentração de proteína e presença de agentes caotrópicos. Ao final deste plano de atividades, pretende-se avançar na compreensão dos processos de oxidação, dissociação e desnaturação da proteína.